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![抵抗素與川崎病患兒冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞損傷關(guān)系.pdf_第1頁(yè)](https://static.zsdocx.com/FlexPaper/FileRoot/2019-3/19/12/2b9b3c88-e421-425b-ad85-e2c859b118c8/2b9b3c88-e421-425b-ad85-e2c859b118c81.gif)
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1、目的:
抵抗素近年來(lái)被認(rèn)為與心血管疾病有密切關(guān)系,有研究表明,作為新發(fā)現(xiàn)的一種脂肪因子,抵抗素可能起到一種炎癥介質(zhì)的作用。課題組前期研究發(fā)現(xiàn)川崎病未接受丙球治療患兒尤其是在冠狀動(dòng)脈損傷患兒血清中抵抗素水平升高,本實(shí)驗(yàn)通過(guò)用川崎病患兒血清及抵抗素等刺激人冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞(HCAEC),模擬川崎病時(shí)冠狀動(dòng)脈內(nèi)微環(huán)境,研究抵抗素在川崎病患兒冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞損傷的可能作用及機(jī)制。
方法:
收集正常兒童及川崎病急性期
2、且未經(jīng)過(guò)丙種球蛋白治療血清,無(wú)菌處理,以正常血清(N),川崎病血清(KD),川崎病血清加抵抗素抗體(KD+antiRe),抵抗素(Re)(40ng/ml)干預(yù)HCAEC24小時(shí),倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài),MTTT法檢測(cè)細(xì)胞活力,化學(xué)比色法檢測(cè)一氧化氮(NO)水平,總一氧化氮合酶(TNOS)及誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(iNOS)活力,RT-PCR檢測(cè)ET-1、iNOS與eNOSmRNA表達(dá)水平的變化,WesternBlot檢測(cè)iNOS蛋白表達(dá),
3、ELISA檢測(cè)iNOS與eNOS蛋白水平的變化。
結(jié)果:
各組HCAEC經(jīng)不同干預(yù)處理24小時(shí)后:
?。?)倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞,見川崎病血清及川崎病血清加抵抗素抗體干預(yù)組細(xì)胞數(shù)目較少,細(xì)胞間隙稍寬,余四組細(xì)胞無(wú)明顯差別
?。?)MTT檢測(cè)出川崎病血清與川崎病血清加抵抗素抗體組細(xì)胞活力下降,余四組無(wú)明顯差別;
?。?)與正常兒童血清組HCAEC相比較,川崎病血清干預(yù)組、川崎病血清加抵抗素抗體干
4、預(yù)組,抵抗素干預(yù)組HCAEC的NO及TNOS、iNOS酶活性升高(p<0.05)。
?。?)與正常兒童血清組及川崎病血清加抵抗素抗體組相比較,川崎病血清與抵抗素組HCAECET-1、iNOSmRNA表達(dá)升高(p<0.05)。
?。?)與正常兒童血清組及川崎病血清加抵抗素抗體組相比較,川崎病血清組與抵抗素組HCAEC干預(yù)24小時(shí)后,iNOS蛋白表達(dá)升高(p<0.05)。
?。?)與正常兒童血清組及川崎病血清加抵抗素
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