水稻粒型基因SHG1的圖位克隆及基因功能研究.pdf_第1頁
已閱讀1頁,還剩79頁未讀, 繼續(xù)免費閱讀

下載本文檔

版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請進行舉報或認領(lǐng)

文檔簡介

1、水稻是世界上重要的糧食產(chǎn)物。粒型是影響水稻產(chǎn)量最重要因素之一,因而,研究克隆影響籽粒長度的基因并闡明其分子機理,將會為通過分子手段培養(yǎng)高產(chǎn)水稻品種奠定堅實基礎(chǔ)。利用EMS誘變,我們分離到一個籽粒長度變小突變體short grain1(shg1)。本研究以shg1為材料,開展一系列表型鑒定、圖位克隆和基因功能等方面研究,主要研究內(nèi)容如下:
  1.shg1與野生型相比,籽粒粒長有顯著的降低,粒寬和粒厚則有顯著的升高,千粒重顯著減少,

2、株高降低,穗長縮短等表型。通過細胞學觀察分析,shg1細胞長寬均顯著低于野生型。
  2.通過圖位克隆的方法,將SHG1基因定位于33Kb區(qū)間之內(nèi),并通過測序其間的7個ORFs,發(fā)現(xiàn)shg1中的第四個ORF與野生型相比有單堿基突變并導致其轉(zhuǎn)錄的提前終止。通過生物信息學分析,SHG1屬于OsKinesin蛋白家族,與狗尾草、大麥等單子葉植物同源蛋白親緣關(guān)系較近,并且其馬達結(jié)構(gòu)域有很高的保守性。
  3.通過構(gòu)建SHG1基因的過

3、表達載體,并轉(zhuǎn)基因得到過表達株系。過表達株系籽粒長、寬均顯著高于野生型,籽粒厚度則顯著低于野生型,千粒重顯著高于突變體,但低于野生型。
  4.實時熒光定量PCR和GUS染色結(jié)果表明SHG1基因在水稻組織中具有較廣譜的表達。通過水稻原生質(zhì)體中SHG1蛋白的亞細胞定位發(fā)現(xiàn)SHG1蛋白是內(nèi)質(zhì)網(wǎng)定位蛋白。全轉(zhuǎn)錄組測序結(jié)果表明shg1突變體中差異基因主要分布在代謝、初級代謝、細胞性蛋白修飾、轉(zhuǎn)運等類別。通過對細胞周期相關(guān)基因表達量的檢測,

4、發(fā)現(xiàn)shg1突變體中多個與細胞周期相關(guān)的基因表達量在突變體中發(fā)生明顯變化,暗示其細胞分裂進程受到影響。
  5.SHG1基因受到外源IAA刺激后表達量上調(diào)。通過雙熒光素酶實驗發(fā)現(xiàn)一些OsARFs可以結(jié)合SHG1的啟動子區(qū)域增強轉(zhuǎn)錄活性。此外,相對于野生型,外源低濃度IAA對于促進shg1根伸長反應的效果不顯著。
  6.通過一系列BR敏感性的檢驗,確定shg1是一個對外源BR較不敏感的突變體。與野生型相比,shg1突變體中B

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預覽,若沒有圖紙預覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負責。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

評論

0/150

提交評論