楊梅抑菌成分及其分離分析.pdf_第1頁(yè)
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1、楊梅(MyricarubraSieb.etZucc)是我國(guó)傳統(tǒng)特產(chǎn)水果,營(yíng)養(yǎng)豐富,有較高的營(yíng)養(yǎng)與保健價(jià)值。其中以其抑菌止瀉的藥用價(jià)值吸引了國(guó)內(nèi)外眾多學(xué)者的關(guān)注目光。由于楊梅中含有大量多酚、黃酮類有潛力的抑菌物質(zhì),因此開發(fā)楊梅抑菌劑既可以充分利用現(xiàn)有資源又可以滿足現(xiàn)今消費(fèi)者對(duì)食品安全日益提高的要求,具有廣闊的應(yīng)用前景。 本文首先采用水、乙醇(純)、丙酮、乙酸乙酯4種溶劑對(duì)楊梅果實(shí)中的有效抑菌物質(zhì)進(jìn)行粗提,并對(duì)比了4種粗提物對(duì)14種

2、革蘭氏陽(yáng)性致病菌和革蘭氏陰性致病菌的抑菌特性。結(jié)果表明,4種提取物對(duì)14種致病菌均有較好的抑制作用(在p<0.05水平?jīng)]有顯著性差異)。相比之下,水提取物對(duì)甲型副傷寒沙門氏菌的抑菌活性最強(qiáng);同時(shí)測(cè)定了水提取物對(duì)14株受試菌株的最低抑菌濃度(MIC),甲型副傷寒沙門氏菌CMCC50093和李斯特菌ATCC35897、ATCC35152、ATCC33090最敏感,其MIC均為2.07mg浸膏/mL;乙型溶血性鏈球菌CMCC32210、金黃色

3、葡萄球菌ATCC6538、志賀氏痢疾桿菌CMCC51334、CMCC51573-10、副溶血性弧菌ATCC17803的MIC為4.14mg浸膏/mL,而對(duì)其他2種沙門氏菌CMCC50013、ATCC13076以及埃希氏大腸桿菌ATCC8099的抑菌效果相對(duì)較差,其MIC為8.28mg浸膏/mL。 測(cè)定了4種提取物中總黃酮、鞣質(zhì)和可滴定酸度,發(fā)現(xiàn)總黃酮含量差異顯著,而鞣質(zhì)和可滴定酸度含量的差異不顯著(p<0.05)。在對(duì)比楊梅提取

4、物的體內(nèi)外抑菌效果時(shí),分別以模擬人工腸液和肉湯培養(yǎng)基為營(yíng)養(yǎng)介質(zhì),同時(shí)采用比濁法和活菌計(jì)數(shù)方法測(cè)定致病菌在楊梅水提物存在下的生長(zhǎng)曲線。結(jié)果顯示,楊梅果實(shí)水提取物在模擬人工腸液介質(zhì)中對(duì)受試菌種的抑菌效果并不如在肉湯培養(yǎng)基介質(zhì),這與酒浸楊梅可治療腹瀉的現(xiàn)象相悖。根據(jù)上述體內(nèi)外抑菌和成分分析結(jié)果,推測(cè)楊梅提取物中的鞣質(zhì)和有機(jī)酸可能是主要抑菌成分,可能是模擬人工腸液中的糖苷酶、蛋白酶等消化酶影響了鞣質(zhì)的抑菌活性。 為研究楊梅果實(shí)水提取物的

5、有效抑菌成分,采用溶劑分級(jí)法對(duì)鞣質(zhì)進(jìn)行分離純化,以金黃色葡萄球菌為代表菌,測(cè)定各分級(jí)產(chǎn)物的抑菌活性。發(fā)現(xiàn)乙醇、氯仿、石油醚只除去了粗提物中的糖類、蛋白質(zhì)、蠟質(zhì)以及脂類等非活性物質(zhì);乙醚的分級(jí)物未顯現(xiàn)抑菌活性,說(shuō)明粗提物中不含弱極性的多酚類物質(zhì),而乙酸乙酯分級(jí)物和水的分級(jí)物均有明顯的抑菌活性,說(shuō)明楊梅果實(shí)中的多酚類抑菌物質(zhì)為中等極性和強(qiáng)極性多酚類。另外還發(fā)現(xiàn),乙酸乙酯分級(jí)所得楊梅多酚的抑菌活性隨乙醇溶液除雜時(shí)間的延長(zhǎng)而有所增強(qiáng)。進(jìn)一步用單

6、因素及正交試驗(yàn)對(duì)優(yōu)化乙醇純化過(guò)程。結(jié)果表明,乙醇處理時(shí)間對(duì)提取物的抑菌效果影響最為顯著,最佳條件為:處理時(shí)間24h;乙醇溶液濃度90%;溫度25℃。 采用紫外掃描、超高效液相-質(zhì)譜聯(lián)用(UPLC-DAD-ESI-MS)等技術(shù)分析鑒定水和乙酸乙酯分級(jí)物中主要成分。發(fā)現(xiàn)水分級(jí)物中主要成分為矢車菊色素3-葡萄糖苷;乙酸乙酯分級(jí)物的主要成份為矢車菊色素3-葡萄糖苷、楊梅黃酮脫氧六碳糖苷、櫟精3-O-葡萄糖苷和櫟精脫氧六碳糖苷,其中矢車菊

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