貓爪草有效部位和質量控制的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、中藥有效成分群辨識技術的研究是中醫(yī)藥研究的關鍵技術之一,本論文以臨床具有顯著療效但尚未進行系統(tǒng)研究的中藥材貓爪草為研究對象,對有效成分群的辨識方法及功效相關性進行了探索性研究。
   貓爪草Radix Ranunculi Ternati系毛茛科植物小毛茛Ranunculusternatus Thunb.的塊根,性甘、辛,微溫,具有清熱解毒、消腫散結的功效,臨床研究表明,貓爪草及其制劑對肺結核、淋巴結核和多種癌癥及淋巴瘤具有顯著療

2、效。現代藥理研究表明,貓爪草水提液不僅對金黃色葡萄球菌、綠膿桿菌等細菌有抑制作用,對S-180腫瘤株有顯著抑制作用。
   論文以化合物類別為試驗單位,以結核桿菌藥敏試驗和細胞毒試驗為藥效指標,篩選了有效部位,并應用HPLC-MSn技術進行了譜效相關性和化合物辨識方法的探索性研究,進行了有效部位成分的分離和藥材質量控制的研究。
   論文由文獻綜述和實驗兩部分組成。
   第一部分文獻綜述
   通過對報

3、道文獻資料的研究,對貓爪草的植物來源和商品用藥、資源分布、化學成分、質量控制、藥理活性、功效主治及臨床應用等方面的研究進行了較為系統(tǒng)的綜述。
   第二部分實驗部分
   一、有效部位的研究
   1.論文采用樹脂分離結合溶劑萃取的方法,以化合物類別為分離單位,提取分離了進行藥效試驗的物質,并結合結核桿菌藥敏試驗和細胞毒試驗,進行了有效部位篩選試驗。
   2.應用HPLC-MS技術首次對貓爪草有效部位進

4、行了譜效相關性研究;并應用HPLC-MS/MS技術首次對有效部位的化學成分進行了辨識方法的探索;檢索了有效部位31個化學成分可能的化學式,并利用HPLC-MS/Ms的碎片離子的精確質量數,推測了裂解方式,根據碎片信息,推測了19個可能的化合物,并用對照品驗證了丁二酸、辛二酸、壬二酸、癸二酸、咖啡酸等化學成分。
   3.首次通過對MS/MS失去碎片信息的分析,統(tǒng)計結果顯示有效部位中有多種有機酸存在,并可分為四類:一為芳香酸及其糖

5、苷,二為脂肪二元酸及其糖苷,三為羥基羧酸及其糖苷,四為雜環(huán)羧酸及其糖苷,其化合物辨識及驗證尚有待進一步探索。
   4.利用C18、硅膠、葡聚糖凝膠(LH-20)等層析分離技術及制備液相等手段對有效部位進行了分離,得化合物有:辛二酸,壬二酸、癸二酸、咖啡酸、香草酸、β-谷甾醇。其中辛二酸、壬二酸、癸二酸、咖啡酸、香草酸為本論文首次從貓爪草中分離得到。
   二、藥材質量控制研究
   根據現行版《中國藥典》藥材質

6、量標準的條款及目前該藥材的藥典標準,論文在鑒別、檢查和含量測定項進行了研究,并起草了藥材質量標準修訂草案。研究內容包括以下4個方面:
   1.鑒別項,研究制定了藥材的薄層鑒別方法;同時論文首次研究了應用傅立葉變換紅外分光光度法對貓爪草藥材進行鑒別的方法,并探索了應用紅外分光光度法進行藥材鑒別的參數設置。
   2.檢查項,對10批次藥材的水分、灰分、酸不溶性灰分、重金屬和浸出物含量進行了測定,為修訂質量標準提供了參考依

7、據。
   3.含量測定項,結合藥效試驗,選擇了總游離酸、總黃酮為分析對象,進行了貓瓜草中總游離酸和總黃酮含量測定方法的研究。
   (1)首次建立了應用電位返滴定法,直接測定藥材中總酸含量的方法,該方法操作簡便、結果可信,重復性好,方法學考察結果表明:符合含量測定的要求。
   (2)應用差示分光光度法的原理,以堿性供試品溶液為參比,建立了中藥材貓爪草中總黃酮含量的測定方法。方法操作簡便,結果可信,重現性好,方

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