1、目的：研究在胃癌進展過程中hTERT基因啟動子區(qū)CpG位點甲基化狀態(tài)變化情況，探討啟動子區(qū)甲基化和hTERT基因表達及其與端粒酶活性的關系，為胃癌的早期診斷提供理論依據(jù)和實驗基礎。 方法：提取正常胃粘膜、胃癌前病變、胃癌組織中的基因組DNA。利用亞硫酸氫鹽修飾基因組DNA，使hTERT啟動子區(qū)CpG位點中，未發(fā)生甲基化的胞嘧啶(C)變?yōu)槟蜞奏?U)。在不含CpG位點的位置設計引物，進行PCR擴增。產物經測序后與原序列比對，匯總每

2、組標本中目的片段所含的27個CpG位點甲基化情況；利用PCR特異性擴增hTERT基因，以瓊脂糖凝膠電泳檢測其在正常胃粘膜、胃癌前病變、胃癌組織中表達陽性率；采用TRAP法檢測正常胃粘膜、胃癌前病變、胃癌組織中端粒酶活性。 結果： 1.胃癌組織中hTERT啟動子區(qū)域甲基化程度高于胃癌前病變組和正常組，三組間差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。 2.hTERT在胃癌中表達陽性率高于胃癌前病變，正常胃粘膜中不表達，三組

3、間的差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。 3.胃癌組端粒酶活性高于胃癌前病變組，正常胃粘膜未檢測到端粒酶活性，三組間差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。 結論： 正常胃粘膜hTERT啟動子區(qū)甲基化程度較胃癌前病變和胃癌低，提示在胃癌進展過程中hTERT啟動子區(qū)甲基化程度逐漸增高，可作為腫瘤早期診斷的潛在分子生物學標記。在胃癌進展過程中hTERT啟動子區(qū)甲基化程度表達逐漸增高，且該基因表達與端粒酶活性也逐步增高，提示h