體外雪旺細(xì)胞培養(yǎng)與純化的實(shí)驗(yàn)研究.pdf_第1頁(yè)
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1、目的:探討簡(jiǎn)單、可靠地獲取大量純度高、活力強(qiáng)的雪旺細(xì)胞的細(xì)胞培養(yǎng)方法。 方法:取新生4-6天大鼠坐骨神經(jīng)。利用植塊法培養(yǎng)雪旺細(xì)胞。采用混合酶多次消化法,差速貼壁法,結(jié)合阿糖胞苷抑制成纖維細(xì)胞來(lái)分離雪旺細(xì)胞,促細(xì)胞增殖劑增加雪旺細(xì)胞數(shù)量,低濃度胰酶快速消化傳代進(jìn)一步純化雪旺細(xì)胞,并對(duì)培養(yǎng)的細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)、MTT法檢測(cè)細(xì)胞增殖能力、形態(tài)學(xué)觀察和細(xì)胞免疫化學(xué)染色鑒定。 結(jié)果:雪旺細(xì)胞生長(zhǎng)良好,經(jīng)細(xì)胞免疫組織化學(xué)染色鑒定,培養(yǎng)

2、8天原代雪旺細(xì)胞的純度可達(dá)94%以上,傳代雪旺細(xì)胞純度在95%以上。細(xì)胞計(jì)數(shù)顯示原代雪旺細(xì)胞倍增時(shí)間約為5天。生長(zhǎng)曲線(xiàn)顯示第2代雪旺細(xì)胞倍增時(shí)間為3天。 結(jié)論:采用植塊法與混合酶多次消化法,差速貼壁法,抗有絲分裂法,促細(xì)胞增殖劑,低濃度胰酶快速消化法相結(jié)合的改良的雪旺細(xì)胞培養(yǎng)純化方法能快捷地獲得純度高、活力強(qiáng)的大量雪旺細(xì)胞。 應(yīng)用該改良的雪旺細(xì)胞培養(yǎng)法培養(yǎng)的原代雪旺細(xì)胞純度為94.3%,傳代后的雪旺細(xì)胞純度為95.5%,

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