1、極低密度脂蛋白受體(very low density lipoprotein receptor，VLDLR)是低密度脂蛋白受體家族中的一員，主要作用是通過與富含ApoE的脂蛋白結(jié)合來調(diào)控甘油三酯的代謝。在動物體內(nèi)，VLDLR主要分布于骨骼肌、脂肪、心臟等組織，在肝臟中分布較少。本實(shí)驗(yàn)在前期實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上，對高郵鴨VLDLR基因的多態(tài)性進(jìn)行了進(jìn)一步的分析，在5'端UTR及信號肽編碼區(qū)位置檢測出4出個新的SNPs位點(diǎn)，同時(shí)對VLDLR基因多態(tài)

2、性與高郵鴨生長性狀和屠宰性狀進(jìn)行了相關(guān)分析;在通過RT-PCR的方法對正常鴨和雞不同組織VLDLRmRNA的表達(dá)分布情況進(jìn)行研究的基礎(chǔ)上，對MD雞不同組織VLDLR mRNA的表達(dá)進(jìn)行檢測，以期研究發(fā)生腫瘤的禽組織VLDLR mRNA的表達(dá)變化情況。
　　1高郵鴨VLDLR基因5'端UTR及信號肽編碼區(qū)多態(tài)性與生長和屠宰性狀的關(guān)聯(lián)分析
　　本實(shí)驗(yàn)以高郵鴨群體為研究對象，采用PCR擴(kuò)增、測序法等方法測定了267個樣VLDLR基

3、因5'端UTR及信號肽編碼區(qū)部分序列，在該段序列中檢測出4個SNPs(g.151G＞A、g.170C＞T、g.206A＞G、g.278-295+＞-)，基于這4個SNPs位點(diǎn)，采用PHASE2.0軟件構(gòu)建了8種單倍型，其中ACG+為主要單倍型，頻率高達(dá)29.81％; GTG+和ACA+單倍型頻率最低，均為0.96％。另外，在8個單倍型的基礎(chǔ)上構(gòu)建了15種雙倍型，其中H4H8頻率最高，為28.16％。關(guān)聯(lián)分析結(jié)果表明，在第6周齡，雙倍型H

4、1H1的體重顯著高于H2H8型(P＜0.05），在7至10周齡，雙倍型H1H1的體重極顯著高于H2H8型(P＜0.01)，顯著高于H4H8型(P＜0.05)。與此同時(shí)，雙倍型H5H8的腹脂率極顯著高于H1H1型和H2H8型(P＜0.01)，顯著高于H4H8型(P＜0.05），雙倍型H4H8的腹脂率顯著高于H1H1型(P＜0.05）。最小二乘法分析結(jié)果表明，雙倍型H1H1的平均體重最高，H2H8最低;雙倍型H2H8的屠宰率、半凈膛率和全凈

5、膛率最高;雙倍型H5H8的腹脂率最高，H4H8型次之，H1H1型最低。表明雙倍型H1H1為優(yōu)勢組合，有可能用來作為提高高郵鴨胴體性能和選擇高瘦肉率優(yōu)良品種的分子標(biāo)記。
　　2家禽VLDLR基因mRNA在不同組織中的表達(dá)分析
　　為研究VLDLR在腫瘤發(fā)生中的表達(dá)變化，本實(shí)驗(yàn)首先對VLDLR基因在鴨和雞不同組織內(nèi)的表達(dá)水平和分布情況進(jìn)行探討。
　　快速采集高郵鴨和成年海蘭白雞骨骼肌、肺臟、脂肪、脾臟、肝臟5種組織提取RN

6、A，反轉(zhuǎn)錄成cDNA保存于-20℃?zhèn)溆?。根?jù)GenBank中的鴨和雞VLDLR基因序列設(shè)計(jì)引物并進(jìn)行RT-PCR擴(kuò)增，檢測5種組織中VLDLR基因的相對表達(dá)水平。結(jié)果顯示VLDLR基因在鴨和雞不同組織間的表達(dá)存在差異，均表現(xiàn)為骨骼肌表達(dá)量最高，肺臟和脂肪組織次之，肝臟表達(dá)量最低。鴨的5種組織相對表達(dá)量表現(xiàn)為為骨骼肌(57.47±0.10)＞肺臟(11.72±0.28)＞脂肪組織(4.13±0.05)＞脾臟(1.76±0.14)＞肝臟(1

7、.00±0.15);雞表現(xiàn)為骨骼?。?0.95±0.14）＞肺臟（3.87±0.23）＞脂肪組織（3.02±0.11）＞脾臟（2.31±0.08）＞肝臟（1.00±0.17）。二者相同，脾臟、肺臟、骨骼肌和脂肪內(nèi)VLDLRmRNA的表達(dá)均極顯著高于肝臟(P＜0.01)，肺臟內(nèi)VLDLR mRNA的表達(dá)高于脂肪，二者差異極顯著(P＜0.01)。本實(shí)驗(yàn)顯示了VLDLR基因在肺臟有較高的表達(dá)量，脾臟也有一定的表達(dá)。
　　3 MDV對雞V

8、LDLR mRNA表達(dá)的影響
　　本實(shí)驗(yàn)研究對象為自然條件下感染MDV雞、MDV RB1B毒株攻毒雞和禽霍亂(PM)雞。采集3種雞肝臟、脾臟、肺臟、骨骼肌、脂肪等組織提取RNA，反轉(zhuǎn)錄成cDNA于-20℃保存?zhèn)溆?。根?jù)GenBank中的雞VLDLR基因序列設(shè)計(jì)引物并進(jìn)行RT-PCR擴(kuò)增，檢測雞VLDLRmRNA在5個組織中的相對表達(dá)水平。結(jié)果顯示VLDLR基因在3種雞不同組織間的相對表達(dá)存在差異。在感染MDV雞不同組織內(nèi)的相對表達(dá)

9、情況為骨骼肌(7.88±0.095)＞肝臟(1.00±0.041)＞肺(0.649±0.027)＞脂肪(0.168±0.053)＞脾臟(0.05±0.021)，脾臟、肺臟和脂肪組織內(nèi)VLDLRmRNA的表達(dá)量均極顯著低于肝臟的表達(dá)量(P＜0.01)，同時(shí)VLDLR在肺臟的表達(dá)量比脂肪組織高，表現(xiàn)為差異極顯著(P＜0.01)。在攻毒MDV RB1B毒株雞不同組織的相對表達(dá)情況為骨骼肌(30.18±0.074)＞脂肪(5.13±0.061)

10、＞肺(2.99±0.178)＞肝臟(1.00±0.390)＞脾臟(0.41±0.117)，脾臟內(nèi)VLDLRmRNA的表達(dá)量低于肝臟，旦兩者差異不顯著，肺臟、骨骼肌和脂肪組織內(nèi)VLDLR表達(dá)量均顯著高于肝臟(P＜0.01)，脂肪內(nèi)VLDLR mRNA的表達(dá)高于肺，二者差異極顯著(P＜0.01)。在PM雞不同組織的相對表達(dá)情況為骨骼肌(84.83±0.183)＞肺(13.17±0.307)＞脂肪(2.72±0.050)＞脾臟(1.17±0.

11、214)＞肝臟(1.00±0.343)，脾臟的表達(dá)量略高于肝臟，二者差異不顯著，肺臟、骨骼肌和脂肪內(nèi)VLDLR mRNA的表達(dá)極顯著高于肝臟(P＜0.01)，肺臟內(nèi)VLDLR mRNA的表達(dá)高于脂肪，二者差異極顯著(P＜0.01)。結(jié)果顯示，MDV感染雞肝臟（發(fā)生腫瘤的肝臟）組織中VLDLR mRNA的表達(dá)超過了脂肪、肺臟等組織，而攻毒MDV RB1B毒株后未發(fā)生MDV感染或被其他疾病感染（如PM）的肝臟內(nèi)VLDLR mRNA的表達(dá)量依