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文檔簡介
1、目的:檢測長骨生長正常﹑活躍﹑遲緩三種生長狀態(tài)下,GPR30在長骨生長板中的表達情況,分析其表達在各生長過程中的變化,探討GPR30在長骨生長過程中的作用。
方法:采用丙基硫氧嘧啶(PTU)誘導法構建SD 雌鼠去甲減后追趕生長模型組(B組)提供長骨生長活躍狀態(tài)與正常對照組比較(A組),切除幼鼠卵巢構建去卵巢生長模型組(D組)提供長骨生長遲緩狀態(tài)與去卵巢假手術組(C組)比較。測量各組大鼠脛骨及體重﹑尾長,取平均值作線形圖了解
2、各組大鼠的生長趨勢。采用放射免疫法(RIA)檢測A組﹑B組大鼠血清T4水平及C組﹑D組大鼠血清E2水平用于比較激素水平變化。
于4W、8W、11W 齡分別處死各組雌鼠,取脛骨近端生長板,經(jīng)甲醛固定、10%EDTA 脫鈣、脫水、包埋、切片后對各組各生長階段切片行HE 染色大體觀察生長板的形態(tài),Brdu 檢測生長板軟骨細胞增生情況,SABC 免疫組化法標記生長板中GPR30的表達,人工計數(shù)各生長板中陽性細胞百分數(shù),SPSS 軟
3、件分析比較GPR30在各組各階段生長板中的表達差異。
結果:
1.脛骨長﹑體重﹑尾長在A組﹑C組維持穩(wěn)定快速增長;B組甲減期各指標生長速率明顯低于A組,甲減后生長速率則高于A組同期大鼠的生長速率;各指標生長速率在D組緩慢、平穩(wěn),低于C組。
2.4W 齡幼鼠血清T4水平B組較A組明顯降低,有統(tǒng)計學差異(P<0.05),8W齡二者血清T4水平相當,沒有明顯統(tǒng)計學差異(P>0.05)。8W 齡血清E2
4、水平D組較C組明顯下降,有統(tǒng)計學差異(P<0.05)
3.各時期脛骨生長板A組長于B組,C組長于D組,但在8W、11W 齡B組生長板長度明顯增加。8W 齡Brdu 標記的陽性細胞百分數(shù)B組高于A組,C組高于D組。
4.在4W、8W、11W 時,GPR30的表達在各生長組中逐漸減少,應用SPSS軟件分析得出,在B組生長過程中GPR30 減少最顯著,其次為A組和C組,D組減少程度最輕。(A組,B組,C組,D組GP
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