1、第一部分用流式細(xì)胞儀檢測(cè)循環(huán)腫瘤細(xì)胞和循環(huán)腫瘤干細(xì)胞
　　目的：利用流式細(xì)胞儀檢測(cè)乳腺癌循環(huán)腫瘤細(xì)胞和循環(huán)腫瘤干細(xì)胞,確定其靈敏性。方法：按一定比例將乳腺癌SKBR-3細(xì)胞摻入4個(gè)正常人單個(gè)核細(xì)胞中,根據(jù)SKBR-3細(xì)胞表面特異性抗原的表達(dá),用流式細(xì)胞儀檢測(cè)SKBR-3細(xì)胞的實(shí)際個(gè)數(shù)。
　　結(jié)果：流式細(xì)胞儀檢測(cè)循環(huán)腫瘤細(xì)胞和循環(huán)腫瘤干細(xì)胞的靈敏性分別為0.0005％和0.0004%,即流式細(xì)胞儀可檢測(cè)到106個(gè)MNCs中的5

2、個(gè)腫瘤細(xì)胞或4個(gè)腫瘤干細(xì)胞。結(jié)論：流式細(xì)胞儀檢測(cè)循環(huán)腫瘤細(xì)胞和循環(huán)腫瘤干細(xì)胞有較高的靈敏性。
　　第二部分用QRT-PCR方法檢測(cè)乳腺癌患者循環(huán)腫瘤細(xì)胞和循環(huán)腫瘤干細(xì)胞
　　目的：用QRT-PCR方法檢測(cè)循環(huán)腫瘤細(xì)胞和循環(huán)腫瘤干細(xì)胞,并與流式細(xì)胞儀方法進(jìn)行比較。
　　方法：用QRT-PCR方法檢測(cè)4例正常人和33例乳腺癌患者外周血中EpCAM和CD44的表達(dá),并與流式檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行比較。
　　結(jié)果：乳腺癌患者EpC

3、AM的表達(dá)顯著高于正常對(duì)照組(24.29±44.10vs0.14±0.02×10-5,P=0.000),但是在CTCs<50和CTCs≥50組間無(wú)明顯差異(19.98±23.93versus29.46±29.27×10-5,P=0.696)。乳腺癌患者CD44的表達(dá)稍高于對(duì)照組(0.83±0.82vs0.59±0.10,P=0.569),但在CTSCs陰性和CTSCs陽(yáng)性組間也無(wú)明顯差異(0.85±0.91vs0.81±0.75,P=0

4、.964)。
　　結(jié)論：QRT-PCR方法不能檢測(cè)出CTCs<50和CTCs≥50及CTSCs陽(yáng)性和CTSCs陰性組間的細(xì)微差別。QRT-PCR方法不如流式細(xì)胞儀方法特異性高。
　　第三部分乳腺癌患者循環(huán)腫瘤細(xì)胞和循環(huán)腫瘤干細(xì)胞的水平及其臨床相關(guān)性
　　目的：探討流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)循環(huán)腫瘤細(xì)胞和循環(huán)腫瘤干細(xì)胞在乳腺癌診斷、治療和預(yù)后評(píng)估中的價(jià)值。
　　方法：用流式細(xì)胞儀檢測(cè)45例乳腺癌患者7.5ml外周血中循環(huán)腫瘤細(xì)

5、胞和循環(huán)腫瘤干細(xì)胞的水平,并分析其臨床相關(guān)性。
　　結(jié)果：在CTCs<50和CTCs≥50兩組間,CTCs水平在不同TNM分期、組織學(xué)分級(jí)和ER、PR狀態(tài)間有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P=0.027,0.002,0.018,0.005)。在CTSCs陽(yáng)性和CTSCs陰性兩組中,CTSCs水平在不同的TNM分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移狀態(tài)間有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P=0.020,0.001)。CD45-C中CTCs的比例在不同病理類型間有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P=0.000)。