1、自1981年發(fā)現(xiàn)第一例艾滋病后，艾滋病在全球范圍內(nèi)不斷蔓延，防艾形勢十分嚴(yán)峻。目前，治療艾滋病主要采用高效抗逆轉(zhuǎn)錄病毒療法(highly activeantiretroviral therapy，HAART)。HAART在很大程度上抑制了HIV-1的復(fù)制，延緩了艾滋病的疾病進(jìn)程，提高了艾滋病人的生活質(zhì)量。但是，HIV-1耐藥毒株的不斷出現(xiàn)和抗HIV-1藥物嚴(yán)重的毒副作用的存在，使人們不得不尋找新的HIV-1抑制劑。其中，整合酶抑制劑是一

2、類很有開發(fā)前景的藥物。
　　 合適的藥物篩選方法是進(jìn)行藥物研發(fā)的基礎(chǔ)和關(guān)鍵。目前，HIV-1抑制劑的篩選方法主要有體內(nèi)和體外篩選方法。體內(nèi)篩選方法采用動物模型，周期長、價(jià)格昂貴，因此應(yīng)用的并不普遍。目前，主要以體外篩選方法為主。體外篩選方法又分為分子水平的篩選方法和細(xì)胞水平的篩選方法。分子水平的篩選方法主要以病毒復(fù)制過程中特定的功能性活動或特定結(jié)構(gòu)作為靶點(diǎn)，不能用活細(xì)胞或病毒來直接評價(jià)藥物對靶標(biāo)的作用效果，因此相對于細(xì)胞水平的篩

3、選方法，其實(shí)驗(yàn)結(jié)果可靠性較小，不能真實(shí)反映其在細(xì)胞內(nèi)的作用效果。細(xì)胞水平的篩選方法是在活細(xì)胞內(nèi)檢測藥物的抗病毒效果，結(jié)果更加可靠、穩(wěn)定。
　　 本文在實(shí)驗(yàn)室前期工作的基礎(chǔ)上，建立了一套完整的基于HIV-1假病毒的細(xì)胞水平的HIV-1抑制劑的高通量篩選模型，利用該模型對419種小分子化合物進(jìn)行了檢測，篩選到了17種明顯抑制HIV-1復(fù)制的化合物、12種較明顯抑制HIV-1感染活性的化合物，并通過HIV-1感染細(xì)胞后不同時(shí)間加藥實(shí)驗(yàn)

4、結(jié)合Alu-LTR PCR和2-LTR PCR技術(shù)進(jìn)一步對它們的作用靶點(diǎn)進(jìn)行了分析，確定了這些化合物以HIV-1生活周期中的整合環(huán)節(jié)為靶標(biāo)，屬于整合酶抑制劑。
　　 本文建立的基于HIV-1假病毒的細(xì)胞水平的整合酶抑制劑的初步篩選模型對HIV-1整合酶抑制劑的研發(fā)、篩選具有重要價(jià)值，該模型可快速、簡便地對待測化合物進(jìn)行檢測，檢測結(jié)果對HIV-1整合酶抑制劑的研發(fā)具有重要的指導(dǎo)意義，根據(jù)分析檢測結(jié)果得到的信息，可不斷優(yōu)化化合物的結(jié)