銀杏葉提取物對D-氨基半乳糖-內(nèi)毒素誘導的小鼠急性肝衰竭FGL2及TNF-α表達的影響.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、背景及目的:
  急性肝功能衰竭(ALF)病情進展迅速,死亡率高,嚴重危害廣大勞動人民的身體健康的。ALF目前臨床上無特異的治療方法,肝移植因為各種因素臨床上無法得到廣泛使用。因此,尋找適合我國國情的治療方法有著重大的意義。急性肝衰竭發(fā)病各種機制十分復雜。近些年由內(nèi)毒素誘導以 TNF-α為核心的炎癥反應在ALF發(fā)生發(fā)展過程中的作用受到高度重視,TNF-α通過激活TNF受體激活多重凋亡途徑,加速肝細胞凋亡,導致肝功能衰竭。相關文獻表

2、明ALF有明顯的微循環(huán)障礙,凝血酶的激活在ΑLF微循環(huán)障礙中發(fā)揮關鍵作用。FGL2凝血酶原酶是一種非經(jīng)典凝血途徑的促凝因子。研究發(fā)現(xiàn)在正常肝組織中未表達或少量表達,而在急性肝衰竭中FGL2呈中高度表達。因此減輕或阻斷FGL2及TNF-α表達可為急性肝衰竭的治療提供新的思路。
  銀杏是我國特有的植物,EGB系銀杏葉經(jīng)過萃取的物質(zhì)目前臨床上主要用于治療心腦血管疾病,其具有改善微循環(huán)、清除自由基等作用。但對急性重型肝炎的作用尙未見報道

3、。本研究旨在通過構建小鼠急性肝衰竭動物模型,用不同濃度EGB進行干預,觀察FGL2蛋白、腫瘤壞死因子、肝酶的表達水平,探討EGB對D-氨基半乳糖(D-GαlN)聯(lián)合脂多糖(LPS)構建的小鼠急性肝衰的保護機制,同時為急性肝衰竭的治療提供新的思路和方法。
  方法:
  1.模型的建立及實驗的分組:將昆明種小鼠(SPF級)50只適應性飼養(yǎng)7d后,隨機分成空白、模型、銀杏葉提取物低、中、高劑量5組。
  空白對照組10只,

4、造模前7天每日腹腔予以氯化鈉注射液注射。
  模型組用D-GαIN350mg/kg和LPS30μg/kg同時腹腔注射構建急性肝衰竭。
  銀杏葉提取物干預各組EGB低劑量組50mg/kg、EGB中等劑量100mg/kg、EGB高劑量200mg/kg,每組各10只,每天予以腹腔內(nèi)注射EGB,共7天,于第7天上午予以D-GαlN350mg/kg和LPS30μg/kg同時腹腔注射,于注射后5小時后麻醉,開腹腹主動脈采血、摘取肝臟,

5、供檢測使用。
  2.檢測指標:
  2.1 肝組織病理學檢查:經(jīng)過包埋、切片等處理,后經(jīng)過HE染色經(jīng)過普通光學顯微鏡下觀察肝病理組織結(jié)構變化情況.。
  2.2 免疫組化測定肝組織FGL2蛋白表達。
  2.3 TNF-α檢測采用ELISA法(試劑為上海羅氏生物制藥有限公司產(chǎn)品)。
  2.4 血清學檢查:采用全自動生化分析儀檢測ALT、AST。
  結(jié)果:
  1.模型組肝組織病理表現(xiàn)大片壞

6、死及炎癥細胞侵潤,免疫組化檢測肝組織FGL2蛋白高度表達,與空白組對其血ALT,AST,和腫瘤壞死因子-α(TNF-α)升高差異顯著(P<0.01),急性肝衰竭模型構建成功。
  2.銀杏葉提取物能夠降低肝衰竭小鼠血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT),天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶(AST),以及下調(diào)炎性因子中的腫瘤壞死因子-α(TNF-α)(P<0.01)。
  3.病理學分析表明銀杏葉提取物能夠改善急性肝衰竭時肝組織壞死程度以及肝組織FGL2蛋白

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