1、腎性骨病(Renal Osteodystrophy,ROD)是慢性腎功能衰竭(CRF)常見、嚴重、治療困難的并發(fā)癥.動物實驗已經(jīng)證實,PTH對骨代謝具有雙相作用,即間歇給藥促進成骨,而大劑量持續(xù)給藥則促進骨吸收.在高轉(zhuǎn)換型腎性骨病時,PTH異常增高,病理上以破骨細胞大量增生形成骨吸收陷窩為主要表現(xiàn).由于OPG/RANKL/RANK系統(tǒng)參與了破骨細胞的活化和成熟,故高轉(zhuǎn)換型腎性骨病中,PTH的溶骨作用是否涉及OPG/RANKL/RANK系

2、統(tǒng)基因和蛋白質(zhì)表達的調(diào)控及其傳導(dǎo)通路,從而刺激破骨細胞活化導(dǎo)致的骨吸收,是該研究的目的.第一部分:高轉(zhuǎn)換型腎性骨病中骨保護素及其配體的表達和形態(tài)計量學(xué)觀察結(jié)果顯示:10例慢性腎衰尿毒癥患者經(jīng)骨病理學(xué)檢查證實均為高轉(zhuǎn)換型骨病,以破骨細胞活化形成骨吸收陷窩伴或不伴骨礦化不全為特點.免疫組化顯示尿毒癥患者骨組織中以RANKL陽性表達為主.與正常對照相比,RANKL陽性表達細胞數(shù)目呈顯著增加趨勢,OPG陽性表達細胞數(shù)目呈顯著減少趨勢.骨組織形態(tài)

3、計量學(xué)分析顯示尿毒癥患者RANKL的陽性表達細胞數(shù)目與骨吸收面積和破骨細胞數(shù)目呈顯著正相關(guān).提示,高轉(zhuǎn)換型腎性骨病中,PTH的溶骨作用是通過OPG/RANKL/RANK系統(tǒng)介導(dǎo)的.第二部分:人甲狀旁腺激素(hPTH)對體外培養(yǎng)胎鼠顱蓋骨成骨細胞增殖、分化和骨保護素及其配體表達的影響結(jié)果顯示:100ng/ml hPTH(1-34)在細胞培養(yǎng)的第5天顯著抑制成骨細胞的增殖;在細胞培養(yǎng)的第18天顯著抑制成骨細胞的分化;在整個細胞生長期均抑制O

4、PG基因和蛋白質(zhì)的表達,但能明顯上調(diào)RANKL基因和蛋白質(zhì)的表達,且最大效應(yīng)發(fā)生在成骨細胞的分化期.提示,OPG/RANKL/RANK系統(tǒng)介導(dǎo)了PTH的溶骨作用,早期可能與OPG減少,而晚期與RANKL增加有關(guān).第三部分:人甲狀旁腺激素(hPTH)對調(diào)節(jié)骨保護素及其配體基因表達的PKA和PKC傳導(dǎo)通路影響的比較研究結(jié)果顯示:PKA通路抑制劑H-89 30umol/L能顯著改變100ng/ml hPTH(1-34)導(dǎo)致的OPG和RANKL