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1、目的:探討AXN復合BMSCs構(gòu)建組織工程神經(jīng)修復周圍神經(jīng)缺損的效果。 方法:體外培養(yǎng)大鼠BMSCs,與AXN復合構(gòu)建TEN;雌性Wistar大鼠60只,隨機分為3組,每組20只,建立右坐骨神經(jīng)10mm缺損修復模型。A組:BMSCs與AXN復合構(gòu)建TEN橋接神經(jīng)缺損;B組:單純AXN橋接神經(jīng)缺損;C組:自體神經(jīng)移植組。術(shù)后4w、12w依次進行干細胞的轉(zhuǎn)歸、TEN的移植免疫、神經(jīng)電生理檢測、再生神經(jīng)組織學觀察、小腿三頭肌肌纖維橫徑
2、等檢測判斷坐骨神經(jīng)缺損修復情況。 結(jié)果:1.成功的進行了BMSCs的體外培養(yǎng)和BrdU標記,初始標記率88.36%,免疫組化染色和流式細胞儀檢測培養(yǎng)細胞表型CD44(+)、CD90(+)和CD34(-)。2.AXN與新鮮神經(jīng)相比較細胞和髓鞘被徹底清除,保持了原有的三維仿生結(jié)構(gòu),免疫原成份被清除,流式細胞儀MHCII檢測結(jié)果顯示AXN免疫原性明顯減弱。3.術(shù)后4w,流式細胞儀檢測外周血CD3+、CD4+和CD8+T細胞百分比三組間
3、無統(tǒng)計學差異,取移植段切片熒光顯微鏡下可見再生纖維束狀排列,只有A組S-100表達陽性細胞其細胞核內(nèi)有BrdU陽性表達,B、C組均無表達;術(shù)后12w神經(jīng)電生理檢測顯示,刺激可以通過移植段神經(jīng)到達遠端的效應器,在神經(jīng)支配區(qū)肌肉可以記錄到運動誘發(fā)電位,跨過移植神經(jīng)段的傳導速度,A、C組無統(tǒng)計學差異,A、B和B、C組有統(tǒng)計學差異;組織形態(tài)學觀察顯示再生的神經(jīng)纖維通過遠端吻合口,A、C組較B組排列整齊,軸突粗大、致密,移植段內(nèi)有縱行排列分布的S
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