雞DNA甲基化組織特異性及親本與子代甲基化差異性研究.pdf_第1頁(yè)
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1、本文對(duì)雞DNA甲基化組織特異性及親本與子代甲基化差異性進(jìn)行了研究。結(jié)果如下: (1)為了更準(zhǔn)確靈敏地檢測(cè)基因組水平的DNA甲基化狀態(tài),使用熒光標(biāo)記替代甲基敏感擴(kuò)增片段多態(tài)性(MSAP)方法中的同位素標(biāo)記,優(yōu)化了實(shí)驗(yàn)條件,建立了熒光標(biāo)記的甲基敏感擴(kuò)增片段多態(tài)性方法(F-MSAP)。 (2)根據(jù)F-MSAP擴(kuò)增片段在泳道的出現(xiàn)情況,個(gè)體基因組的甲基化模式可分為三類:TypeⅠ,在兩個(gè)泳道都出現(xiàn)為非甲基化模式;TypeⅡ,只在

2、MspⅠ泳道出現(xiàn)為全甲基化模式;TypeⅢ,只在HpaⅡ泳道出現(xiàn)為半甲基化模式。 (3)以F-MSAP方法檢測(cè)了雞肌肉、心臟、肝臟和腎臟4個(gè)不同組織基因組在CCGG位點(diǎn)的甲基化狀態(tài)。肌肉組織的甲基化程度約為29.4%,肝臟組織約為27.2%,心臟組織的約為27.2%,腎臟組織的約為26.1%。 (4)以F-MSAP方法檢測(cè)了AA、EE、EA、F1AA、F1EE以及F1AE三個(gè)組合基因組CCGG位點(diǎn)的甲基化狀態(tài)以及每個(gè)組合

3、中親本與子代的甲基化差異模式。 (5)進(jìn)一步對(duì)三個(gè)組合進(jìn)行比較,研究發(fā)現(xiàn):AA和EE兩個(gè)純種組合的雙親和子代的甲基化水平?jīng)]有差別,而雜種組合EA的F1子代低于兩個(gè)親本。 (6)隨機(jī)抽取三個(gè)組合不同家系的F1代各30個(gè)個(gè)體,以F-MSAP方法進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果顯示:雜種F1EA基因組的甲基化程度(31.4%)低于純種F1AA(35.7%)和F1EE(32.6%);在F1EA、F1AA和F1EE基因組中共檢測(cè)到537個(gè)甲基化多態(tài)

4、位點(diǎn)。 (7)進(jìn)一步將三個(gè)子代在537個(gè)位點(diǎn)上的甲基化模式進(jìn)行比較:雜種與2個(gè)純種相比,甲基化程度相同的模式約為65.9%,甲基化程度增強(qiáng)的模式約為4.0%,甲基化程度降低的模式約為30.1%。 (8)在甲基化程度相同的模式中,F(xiàn)1EA與F1AA一致的模式為36.7%,與F1EE一致的模式為63.3%。說(shuō)明F1EA群體與F1EE群體基因組的甲基化狀態(tài)更為一致。 (9)獲得了15個(gè)親本與子代甲基化差異片段,BLAS

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