1、玫瑰黃鏈霉菌Men-myco-93-63對(duì)多種植物病原真菌和細(xì)菌有較強(qiáng)的抑制作用,溫室和大田試驗(yàn)表明該菌株的代謝產(chǎn)物對(duì)棉花黃萎病和瓜類白粉病有較好的防效作用,其有效成分和作用機(jī)理正在研究中。雙親株滅活原生質(zhì)體融合擺脫了遺傳標(biāo)記給育種工作帶來(lái)的束縛,使融合子的檢出變得直觀,是值得推廣的一種選育高產(chǎn)菌株的方法。
　　 本文對(duì)玫瑰黃鏈霉菌Men-myco-93-63和變鉛青鏈霉菌TK24的原生質(zhì)體分別進(jìn)行熱滅活和紫外滅活,在PEG40

2、00介導(dǎo)下融合,所得“融合子”以棉花黃萎病菌和馬鈴薯瘡痂病菌為指示菌篩選抗生素高產(chǎn)優(yōu)質(zhì)菌種,傳代培養(yǎng)檢測(cè)高產(chǎn)“融合子”的穩(wěn)定性,并觀察“融合子”的培養(yǎng)特征和形態(tài)特征:利用基因組酶切和可溶性蛋白質(zhì)電泳驗(yàn)證融合子與親本的遺傳關(guān)系；通過(guò)搖瓶發(fā)酵獲得高產(chǎn)融合菌株抗生素粗品的產(chǎn)量,得出增產(chǎn)率；以融合子RH19為代表,采用親株的發(fā)酵培養(yǎng)基對(duì)融合子RH19進(jìn)行搖瓶發(fā)酵實(shí)驗(yàn),利用薄層色譜(TLC)和高效液相色譜(HPLC)分析融合菌株抗生素粗品。通過(guò)玫

3、瑰黃鏈霉菌Men-myco-93-63與變鉛青鏈霉菌TK24原生質(zhì)體的種間融合實(shí)驗(yàn),得到了十四株對(duì)棉花黃萎病菌和馬鈴薯瘡痂病菌具有抑制作用的融合子,融合子RH19抑菌活性明顯強(qiáng)于玫瑰黃鏈霉菌Men-myco-93-63。經(jīng)過(guò)十次傳代發(fā)現(xiàn),融合子的遺傳穩(wěn)定性良好。高產(chǎn)融合子在固體R2YE培養(yǎng)基及液體燕麥培養(yǎng)基上均產(chǎn)生黃綠色色素,并且培養(yǎng)特征和形態(tài)特征明顯不同于親株。對(duì)基因組DNA進(jìn)行酶切發(fā)現(xiàn)融合子的酶切片段與親本不同；對(duì)“融合子”RH19

4、及親本的可溶性總蛋白進(jìn)行了SDS—PAGE分析,發(fā)現(xiàn)“融合子”RH19的可溶性總蛋白圖譜與雙親有一定的相似性又產(chǎn)生了新的條帶；搖瓶發(fā)酵實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示融合子粗提抗生素的產(chǎn)量為0.18g／L,而玫瑰黃鏈霉菌Men-myco-93-63為0.07g／L,增產(chǎn)了159％；TLC和HPLC結(jié)果表明此菌株能夠產(chǎn)生親本不能產(chǎn)生的新的次級(jí)代謝產(chǎn)物。本研究證實(shí)了玫瑰黃鏈霉菌Men-myco-93-63和變鉛青鏈霉菌TK24之間發(fā)生了基因重組。該研究結(jié)果為放