1、滅多威（Methomyl）作為氨基甲酸酯類農(nóng)藥，由于其殺蟲譜廣、毒性高、殺蟲效果好等特點被廣泛用于棉花、果樹和蔬菜的病蟲害防治，隨著其廣泛應(yīng)用，一方面在環(huán)境中多發(fā)現(xiàn)其殘留，另一方面滅多威中毒事件也時有發(fā)生，給人們的健康造成了嚴重的威脅。
　　對滅多威的研究多集中在膽堿酯酶的抑制方面，本次研究擬探討滅多威對大鼠神經(jīng)系統(tǒng)的影響，共分為兩個部分。第一部分在體外條件下，提取紅細胞膜和大鼠腦突觸體，分別探討滅多威對人紅細胞膜、鼠紅細胞膜、鼠

2、腦皮層突觸、小腦突觸、海馬突觸和紋狀體突觸乙酰膽堿酯酶活力的抑制作用及其差異，并對抑制作用類型進行了判定；第二部分在大鼠體內(nèi)條件下，建立滅多威急性經(jīng)口重復(fù)劑量染毒模型，首先從整體水平上利用神經(jīng)行為學(xué)方法評定滅多威對大鼠神經(jīng)行為的影響，并通過組織病理學(xué)方法觀察大鼠神經(jīng)結(jié)構(gòu)的改變，再從分子水平上檢測滅多威染毒對大鼠乙酰膽堿酯酶和氧化抗氧化體系的影響。體外實驗和體內(nèi)實驗相結(jié)合，觀察滅多威對乙酰膽堿酯酶的影響，并從氧化應(yīng)激的角度對滅多威中毒機制

3、進行了探討。
　　第一部分、滅多威對紅細胞膜及不同腦區(qū)突觸體乙酰膽堿酯酶的作用
　　目的：體外條件下研究滅多威對不同部位乙酰膽堿酯酶（AChE）毒作用的差別。
　　方法：體外實驗條件下，確定AChE活力測定的最佳溫度和時間，該條件下測定滅多威對人紅細胞膜、鼠紅細胞膜、皮層突觸、小腦突觸、海馬突觸和紋狀體突觸的劑量-效應(yīng)關(guān)系和時間-效應(yīng)關(guān)系，計算滅多威不同部位的半數(shù)抑制濃度IC50值和雙分子速率常數(shù)Ki值，并同時測定滅多

4、威對AChE活力的抑制類型。
　　結(jié)果：
　?。?）AChE在37℃時，活力最大，初速度反應(yīng)時間為0～17min。
　?。?）滅多威對紅細胞膜和不同腦區(qū)突觸AChE活力的抑制均存在劑量-效應(yīng)和時間-效應(yīng)關(guān)系；對紅細胞膜：IC50值：人紅細胞膜＞鼠紅細胞膜，Ki值則相反；對腦分區(qū)突觸：IC50值：紋狀體＞小腦＞皮層＞海馬，Ki值：皮層＞海馬＞紋狀體＞小腦。
　　（3）雙倒數(shù)作圖顯示隨滅多威濃度增大，AChE最大反應(yīng)

5、速度Vmax減小，Km不變。
　　結(jié)論：在本實驗條件下，可以得出：
　?。?）AChE活力的最佳測試溫度為37℃，且其初速度反應(yīng)時間在17 min之內(nèi)。
　?。?）滅多威對紅細胞膜和不同腦區(qū)突觸中AChE活力的抑制存在明顯的時間-效應(yīng)關(guān)系和劑量-效應(yīng)關(guān)系。
　?。?）滅多威對AChE活力的抑制類型為可逆抑制，且為可逆抑制中的非競爭性抑制。
　?。?）鼠紅細胞膜AChE對滅多威的敏感性大于人紅細胞膜，在腦不同

6、分區(qū)突觸中，皮層突觸AChE對滅多威最為敏感。
　　第二部分、滅多威對大鼠乙酰膽堿酯酶和神經(jīng)系統(tǒng)的影響
　　目的：本次試驗旨在體內(nèi)條件下以雄性大鼠為對象，研究滅多威對AChE以及神經(jīng)系統(tǒng)的影響。
　　方法：將26只雄性SD大鼠隨機分為三組，第一組和第二組進行七天經(jīng)口重復(fù)染毒實驗，一組為對照組，另外一組為給藥組，對照組用雙蒸水處理（0 mg/kg），給藥組則給以滅多威處理（10mg/kg），每組大鼠均為10只，于第1、4

7、、7d進行攀繩實驗、后肢撐力實驗和甩尾實驗；在末次染毒24h后處死大鼠并分離腦組織制作石蠟切片，尼氏染色觀察，同時測定大鼠全血、血清、紅細胞膜和腦各分區(qū)突觸AChE活力，之后對這些部位還原型谷胱甘肽(GSH)和丙二醛(MDA)的含量進行測定。最后一組則給以10mg/Kg的滅多威一次染毒處理，共6只，測定24h內(nèi)大鼠全血膽堿酯酶的變化。
　　結(jié)果：
　　（1）一次染毒大鼠全血AChE活力隨時間先抑制后恢復(fù)，染毒后15min其對

8、全血AChE活力的抑制作用最大，在24h時AChE活力基本上完全恢復(fù)。
　　（2）7d重復(fù)染毒實驗中，末次染毒24 h后在大鼠各組織部位未觀察到AChE活力變化。
　　（3）在大鼠血清、紅細胞膜、皮層突觸、小腦突觸、紋狀體突觸中GSH含量未觀察到變化，在海馬突觸體中GSH含量下降。
　?。?）在大鼠血清、紅細胞膜和紋狀體突觸中MDA含量未見變化，在皮層突觸、小腦突觸和海馬突觸中MDA含量升高。
　?。?）大鼠行為

9、學(xué)實驗中，甩尾指數(shù)和握力指數(shù)未見變化，但后肢撐力指數(shù)在染毒第4d和第7d下降。
　?。?）尼氏染色：與對照組相比，大腦部位染色較淺，胞體較小，細胞排列稍紊亂，不規(guī)則，間隙增大，尼氏小體數(shù)量減少，輪廓不清晰；小腦分子層，顆粒細胞層染色變淺，浦肯野細胞染色明顯變淺，尼氏體數(shù)量明顯減少，神經(jīng)元細胞核固縮，細胞體積變小。經(jīng)軟件分析，大腦和小腦尼氏染色均小于對照組，但差異在大腦無統(tǒng)計學(xué)意義，小腦有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　結(jié)論：在本實驗室的條