1、附紅細胞體病是由附紅細胞體寄生于多種動物和人的紅細胞表面及血漿、骨髓內，以溶血性貧血、黃疸、發(fā)熱為主要臨床癥狀的人獸共患病。為了解東北三省豬附紅細胞體病的流行狀況及基因變異情況，本試驗應用PCR技術對東北三省的600份豬血液樣本進行了檢測，并選取相對保守的16S rRNA核苷酸序列作為分析對象，對吉林株、遼寧株和黑龍江株豬附紅細胞體16S rRNA核苷酸序列進行測序，比對其核苷酸序列。結果表明，黑龍江省豬附紅細胞體陽性率為93.5％

2、r>　　（187/200），遼寧省豬附紅細胞體陽性率為89.5%（179/200），吉林省豬附紅細胞體陽性率為91.5%（183/200）。同源性分析顯示，黑龍江株、遼寧株與廣東株豬附紅細胞體基因同源性最高，均達到100%；吉林株與美國株豬附紅細胞體的基因同源性最高，為97%。系統(tǒng)進化分析顯示，黑龍江株與遼寧株豬附紅細胞體親緣關系最近，而與吉林株豬附紅細胞體較遠。研究表明，黑龍江省、遼寧省、吉林省豬附紅細胞體感染情況嚴重，吉林株、遼寧株

3、和黑龍江株豬附紅細胞體16S rRNA核苷酸序列存在差異。
　　環(huán)介導等溫擴增技術（LAMP）是近年來發(fā)展起來的一項新型檢測技術，LAMP技術以其特異性強、靈敏度高、快速準確和操作簡單等優(yōu)點被廣泛應用于生物學的各個領域，成為可以替代PCR方法的新的核酸擴增技術，在核酸的研究、疾病的診斷和預防、動物胚胎的性別鑒定和轉基因食品檢測等領域得到了日益廣泛的應用。鑒于國內外尚未見應用環(huán)介導等溫擴增技術檢測豬附紅細胞體的報道，本研究針對豬附紅

4、細胞體的16S rRNA基因的保守區(qū)用LAMP在線設計引物軟件設計引物,對內引物濃度、外引物濃度、Mg2+濃度、反應溫度、反應時間等反應參數進行優(yōu)化，建立了LAMP診斷方法，并對建立的豬附紅細胞體LAMP檢測方法進行了敏感性、特異性及穩(wěn)定性評價。結果表明，利用LAMP技術成功檢測到豬附紅細胞體基因區(qū)，該方法的靈敏度可達到能檢測23.7 fg/μl，比PCR方法高10倍；未擴增出新孢子蟲、弓形蟲、瑟氏泰勒蟲的特異性條帶，具有較好的特異性；