1、目的 探討口服卡介苗(BCG)對哮喘小鼠氣道炎癥細(xì)胞及外周血嗜酸粒細(xì)胞(Eos)的影響，并用三色流式細(xì)胞法從細(xì)胞水平探討外周血Th1/Th2平衡的影響。方法 以卵蛋白(OVA)致敏激發(fā)建立哮喘小鼠模型，哮喘動物模型制作成功，先確定口服卡介苗抑制哮喘小鼠支氣管肺泡灌洗液(BALF)中Eos的合適劑量。將32只BABL/c小鼠(年齡6-8周、體重18±2g、雄性)分為正常對照組、哮喘組、皮內(nèi)注射卡介苗+哮喘組、口服卡介苗+哮喘組。皮內(nèi)注射組

2、于第一次OVA激發(fā)前8周卡介苗皮內(nèi)注射干預(yù)，口服卡介苗組于第一次OVA激發(fā)前8周卡介苗口服干預(yù)，收集支氣管肺泡灌洗液和外周血，各類細(xì)胞學(xué)計數(shù)，用ELISA方法測定BALF和外周血中IL-4和IFN-γ，并采用三色流式細(xì)胞法測定外周血Th1/Th2細(xì)胞之比。結(jié)果 確定口服卡介苗抑制哮喘小鼠BALF中Eos的合適劑量(10mg)。哮喘組與卡介苗干預(yù)兩組小鼠BALF中細(xì)胞學(xué)總數(shù)和分類計數(shù)均較正常對照組明顯增多，哮喘組以Eos、淋巴細(xì)胞、中性粒

3、細(xì)胞增多明顯，卡介苗干預(yù)兩組以淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞增多明顯，P＜0.01?？ń槊绺深A(yù)后，口服卡介苗組與皮內(nèi)注射卡介苗組BALF中Eos較哮喘組明顯下降，下降率約50％，P＜0.05，而巨噬細(xì)胞明顯增多，P＜0.05，同時淋巴細(xì)胞有所增多，但無統(tǒng)計學(xué)意義，P＞0.05。不同的是外周血Eos在卡介苗干預(yù)后的兩組與哮喘組比較無統(tǒng)計學(xué)意義，P＞0.05。哮喘組小鼠外周血及BALF中IL-4水平較正常對照組明顯升高，而IFN-γ水平明顯降低，P＜0

4、.05或P＜0.01?？ń槊绺深A(yù)后，與哮喘組比較，皮內(nèi)注射卡介苗組與口服卡介苗組外周血及BALF中IL-4水平明顯下降，而IFN-γ水平明顯升高，P＜0.05或P＜0.01?？ń槊绺深A(yù)兩組之間無統(tǒng)計學(xué)意義，P＞0.05。 此外，哮喘組外周血Thl／Th2細(xì)胞比值(0.694±0.37)較正常對照組(1.23±0.29)明顯下降，P<0.05。與哮喘組比較，皮內(nèi)注射卡介苗組(1.84±0.50)與口服卡介苗組(1.60±0.39)

5、，均具有統(tǒng)計學(xué)意義，P<0.05，卡介苗干預(yù)兩組之間外周血Thl／Th2比值無統(tǒng)計學(xué)意義，P>0.05。同時Tcl／Tc2細(xì)胞比值，哮喘組(0.64±0.36)較正常對照組(1.16±0.45)明顯下降，P<0.05。與哮喘組比較，皮內(nèi)注射卡介苗組(1.34±0.51)與口服卡介苗組(1.26±0.48)，均具有統(tǒng)計學(xué)意義，P<0.05，卡介苗干預(yù)兩組之間外周血Tcl／Tc2比值無統(tǒng)計學(xué)意義，P>0.05?？诜ń槊缃M發(fā)現(xiàn)一只小鼠2周后

6、外耳道紅腫，后病變?yōu)槟撃[，其余沒觀察到明顯不良反應(yīng)。結(jié)論1、口服卡介苗可明顯抑制哮喘小鼠BALF中Eos水平，巨噬細(xì)胞明顯增多。 2、口服卡介苗對哮喘小鼠外周血Eos水平降低無明顯變化。 3、哮喘小鼠Th2型免疫應(yīng)答占優(yōu)勢，卡介苗干預(yù)后，與哮喘組比較，口服卡介苗組小鼠外周血及BALF中IL-4水平明顯下降、IFN-γ水平明顯升高，外周血Thl／Th2與Tcl／Tc2細(xì)胞比值也明顯升高，均具有統(tǒng)計學(xué)意義，能獲得與皮內(nèi)注射卡