1、干擾素是脊椎動(dòng)物機(jī)體抵抗病毒感染的第一道防線(xiàn)，作為Ⅰ-IFN的指示標(biāo)志，抗黏液病毒基因(myxovirus-resistant，Mx)具有較高的研究?jī)r(jià)值。目前關(guān)于鴨Mx的研究較少，本研究初步揭示了DHAV-1/-3感染鴨胚后，鴨胚部分組織器官中Mx與鴨IFN-α及相應(yīng)病毒載量之間的關(guān)系，為深入研究鴨的抗病毒免疫機(jī)制提供必要的理論基礎(chǔ)。
　　本研究以感染DHAV-1的紹鴨腎組織的cDNA為模板，設(shè)計(jì)特異性引物，通過(guò)PCR擴(kuò)增獲得紹鴨

2、Mx基因的CDs，并將其1435-2148bp亞克隆至pET-30a(+)原核表達(dá)載體中，在大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)中進(jìn)行表達(dá)，獲得重組鴨Mx蛋白(rDupET-30a-Mx)，蛋白大小約為35kDa，利用Ni-NTA親和層析獲得純化的目的蛋白。以純化的rDupET-30a-Mx作為免疫原，免疫新西蘭大白兔，制備了兔抗鴨Mx蛋白多克隆抗體，經(jīng)Ⅰ-ELISA檢測(cè)，抗體效價(jià)在1∶102400以上。以重組蛋白為檢測(cè)抗原的Western blot結(jié)果顯

3、示，制備的多抗能識(shí)別成年鴨和鴨胚中的Mx蛋白。
　　分別以103ELD50的DHAV-1和DHAV-3接于15日齡SPF鴨胚上，在接毒后3h、6h、12h、24h、48h取其心、肝、胃、腸、肌肉，qPCR檢測(cè)各組織中Mx、IFN-α及DHAV-1和DHAV-3的mRNA的相對(duì)表達(dá)量，Western blot檢測(cè)Mx蛋白的表達(dá)水平。結(jié)果顯示，在心、肝、胃、腸、肌肉中，Mx與IFN-α的mRNA在3-12h變化趨勢(shì)基本一致;在心、肝、