1、湖南大學博士學位論文日本血吸蟲及其它生命物質的壓電免疫傳感技術研究姓名：吳朝陽申請學位級別：博士專業(yè)：分析化學指導教師：沈國勵俞汝勤2000.6.1湖南大學分析化學專業(yè)博士學位論文吳朝陽2000年6月第=部分：提出了兩種基于正丁胺等離子體聚合膜(BAPPF)抗體的可逆固定化方法。一種方法是，基于BAPPF上帶有少量的正電荷，在膜上先自組一聚電解質層，靜電吸附固定羊抗人IgG抗體于BA—PPF上。該傳感器可在070。126og／ml范圍測

2、試正常人血清IgO。另一方法是，在BAPPF上修飾可與金屬離子螯合的氨三乙酸基團，用金屬離子活化后，修飾了二乙三胺五乙酸基團的抗體蛋白質分子即可螯合固定于BAPPF上。該傳感器可在036～126gg／ml范圍對正常人血清IgG進行測定。上述方法克服了等離子體聚合膜上共價固定抗體使傳感器不能多次使用的缺點，可望成為普適的蛋白質固定化方法。第三部分：提出了兩種直接質量放大的免疫傳感技術。一種是，在測試溶液中加入一定量的抗體，待測抗原以抗原抗

3、體復合多層的方式結合到石英晶體表面，提高晶體表面單位面積上的質量變化，從而提高傳感器的靈敏度。用該方法測試了人血清IgM，靈敏度為5301Hz／(ggml“)，檢測下限為102pg／ml。另一方法是，在測試溶液中加入蛋白A修飾的褐藻酸，IgG分子通過Fv端與固定抗原反應時，其Fc端可與溶液中蛋白A結合，從而增大免疫反應引起的質量變化。傳感器的頻率響應與日本血吸蟲感染兔血清抗體IgG在028—8599／ml范圍存在良好的線性關系。與常規(guī)的

4、壓電免疫分析比較，這兩種質量放大方法的靈敏度和檢測下限均有較大提高。第四部分：提出了一種基于聚乙二醇(PEG)凝集的壓電免疫分析技術(PEGPI)。將壓電石英晶體插于抗原(抗體)與PEG的復合物溶液中，直接響應待測抗體(抗原)免疫凝集反應引起的溶液粘度、密度、介電常數(shù)以及晶體表面吸附量的變化。該方法無需抗原(抗體)的固定，方法簡單、快速，整個測試過程只需幾分鐘或十幾分鐘即可完成。探討了這種PEGPI的響應機理，并初步應用于日本血吸蟲抗體