1、目的：通過(guò)比較胃癌耐藥細(xì)胞株SGC7901/DDP和非耐藥細(xì)胞株SGC7901中Akt1及其下游核轉(zhuǎn)錄因子NF-κB p65、FOXO3a表達(dá)的變化，探討導(dǎo)致胃癌耐藥的PI3K-AKT通路的調(diào)節(jié)機(jī)制，以期為胃癌多藥耐藥的防治提供理論依據(jù)。并通過(guò)觀察Akt1及NF-κB、FOXO3a在胃癌組織中的表達(dá),探討其與胃癌臨床病理之關(guān)系。 方法：1. 應(yīng)用化療藥物順鉑按照0.02-1.0ug/ml濃度梯度遞增誘導(dǎo)胃癌SGC7901細(xì)胞株，

2、形成胃癌耐藥細(xì)胞株SGC7901/DDP。將其培養(yǎng)在DDP濃度為0.5ug/ml的培養(yǎng)液中以維持其耐藥表型。以非耐藥細(xì)胞株SGC7901作對(duì)照，應(yīng)用RT-PCR及Western Blotting分別從mRNA水平及蛋白水平檢測(cè)Akt1、NF-κB p65、FOXO3a的表達(dá)差異。分析耐藥胃癌細(xì)胞中Akt1的變化及其與下游NF-κB、FOXO3a的關(guān)系。 2.取胃癌患者的腫瘤組織標(biāo)本，制成組織芯片，以非胃癌患者的正常胃粘膜活檢組織

3、為對(duì)照，檢測(cè)胃癌組織與正常胃粘膜組織中Akt1、NF-κB p65、FOXO3a的表達(dá)的差異，并進(jìn)一步分析胃癌組織中Akt1、NF-κB p65、FOXO3a與臨床病理學(xué)特征的關(guān)系，以及Akt1表達(dá)與其下游核轉(zhuǎn)錄因子NF-κB p65、FOXO3a之間的關(guān)系。 結(jié)果：1. 與胃癌非耐藥細(xì)胞株SGC7901相比，胃癌耐藥細(xì)胞株SGC7901/DDP中Akt1、NF-κB p65 mRNA和蛋白水平的表達(dá)顯著升高（p<0.05），而

4、FOXO3a mRNA和蛋白的表達(dá)水平則下降（p<0.05）。2.免疫組織化學(xué)研究顯示，胃癌組織的Akt1和NF-κB的陽(yáng)性表達(dá)率顯著高于正常胃粘膜組織，且其表達(dá)與腫瘤大小，分化程度，浸潤(rùn)深度，脈管浸潤(rùn)顯著相關(guān)；而FOXO3a在胃癌中陽(yáng)性表達(dá)則較正常胃組織顯著降低（p<0.05）。3.胃癌患者的腫瘤組織中Akt1表達(dá)與NF-κB表達(dá)呈正相關(guān)，而與FOXO3a表達(dá)呈負(fù)相關(guān)（p<0.05）。 結(jié)論：1. 胃癌耐藥細(xì)胞株SGC7901

5、/DDP中Akt1及其下游核轉(zhuǎn)錄因子NF-κB表達(dá)上調(diào)，而FOXO3a表達(dá)則下調(diào)。提示胃癌耐藥的PI3K-AKT通路可能是通過(guò)NF-κB的表達(dá)上調(diào)、FOXO3a的表達(dá)下調(diào)起作用的。2. 胃癌組織中AKT1及NF-κB陽(yáng)性表達(dá)較正常胃組織顯著升高，其表達(dá)與腫瘤大小，分化程度，浸潤(rùn)深度，脈管浸潤(rùn)顯著相關(guān)；而FOXO3a在胃癌中陽(yáng)性表達(dá)則較正常胃組織顯著降低，提示Akt1及其下游靶蛋白NF-κB和FOXO3a可能參與了胃癌的發(fā)生、發(fā)展，NF-