1、目的: 動(dòng)態(tài)觀察miRNA21在糖尿病大鼠腎組織及高糖環(huán)境下腎小管上皮細(xì)胞中的表達(dá)變化，探討miRNA21在糖尿病腎病發(fā)病過程中的作用及其作用機(jī)制，為糖尿病腎病的防治尋求新的靶點(diǎn)。
　　方法: 雄性 SD大鼠隨機(jī)分為正常對(duì)照組（NC）、糖尿病組（DM），糖尿病胰島素治療組(INS)。采用鏈脲佐菌素（55mg/kg）尾靜脈注射復(fù)制1型糖尿病大鼠模型，NC組和DM組成模后分別于8周（8w）、16周（16w）、24周（24w）處死；成模

2、13周起，INS組大鼠采用胰島素個(gè)體化治療，以血糖控制在4-7mmol/L，尿糖陰性為準(zhǔn)，于24周時(shí)處死大鼠。體外培養(yǎng)大鼠腎小管上皮細(xì)胞(NRK52E)，隨機(jī)分為:正常糖對(duì)照組和高糖組。生化方法測(cè)血糖、24h尿蛋白；HE染色光鏡下觀察胰腺組織形態(tài)結(jié)構(gòu)變化，HE、PAS、Masson染色光鏡下觀察腎組織形態(tài)結(jié)構(gòu)變化；免疫組化觀察大鼠腎臟 TGF-β1、FN、Col-1、Col-3、E-cadherin、α-SMA蛋白的表達(dá)情況；Weste

3、rn blotting檢測(cè)大鼠腎組織 E-cadherin、α-SMA蛋白的表達(dá)變化；Realtime-PCR檢測(cè)大鼠腎組織及高糖環(huán)境下腎小管上皮細(xì)胞miRNA21的表達(dá)情況。
　　結(jié)果: （1）與NC組大鼠相比，各組DM大鼠血糖和24h尿蛋白量均顯著升高(P<0.05)；與DM組比較，INS組上述指標(biāo)則明顯降低(P<0.05)，且腎纖維化病變改善。（2）免疫組化結(jié)果顯示，與NC組大鼠相比較，DM大鼠腎組織TGF-β1、FN、Co

4、l-1、Col-3和α-SMA表達(dá)明顯增加(P<0.05)，E-cadherin表達(dá)減少(P<0.05)；與DM組相比，INS組 TGF-β1、FN、Col-1、Col-3和α-SMA的表達(dá)明顯減少(P<0.05)，E-cadherin的表達(dá)顯著增多(P<0.05)。（3）Western blotting結(jié)果顯示，與NC組大鼠相比，DM大鼠腎組織 E-cadherin的表達(dá)減少（P<0.05）、α-SMA表達(dá)增加（P<0.05）；與DM

5、組相比，INS組大鼠腎組織E-cadherin的表達(dá)增加（P<0.05）、α-SMA表達(dá)減少（P<0.05)。（4）Realtime-PCR結(jié)果顯示 DM大鼠腎組織miRNA21 mRNA的表達(dá)較NC組大鼠增多（P<0.05），而INS組miRNA21 mRNA表達(dá)較DM組顯著減少（P<0.05)；經(jīng)高糖處理后腎小管上皮細(xì)胞miRNA21 mRNA較正常糖對(duì)照組表達(dá)增多（P<0.05)。
　　結(jié)論: (1) miRNA21 mRN