1、本試驗探討了基本培養(yǎng)基、植物生長調節(jié)劑、培養(yǎng)條件、接種方式、碳源等因素對鐵皮石斛擬原球莖的誘導和增殖、分化培養(yǎng)的影響以及培養(yǎng)基成分、培養(yǎng)條件等對擬原球莖中的藥用有效成分，如石斛多糖、總生物堿等的積累的影響進行了研究，研究結果如下： 1．通過比較MS、LS、B5、N6、H、Nitsch、White和WPM8種基本培養(yǎng)基對鐵皮石斛擬原球莖的誘導、增殖、分化和試管苗壯苗生根的影響，發(fā)現N<,6>培養(yǎng)基適合于鐵皮石斛擬原球莖誘導和增殖，

2、B5培養(yǎng)基適合擬原球莖的分化培養(yǎng)和試管苗的壯苗生根。 2．2，4-D、NAA和IBA三種生長素均可誘導出擬原球莖，誘導率都在65％以上，其中以0.5 mg/L2，4-D，0.5-1.0mg/LNAA，1.0mg/LIBA效果最好。2，4-D和6-BA，以及2，4-D和KT結合使用均不利于擬原球莖誘導和增殖。1.0mg/LNAA+0.3-0.5 mg/L6-BA、1.0mg/L IBA+0.5 mg/L6-BA誘導出的擬原球莖生長

3、旺盛，富有光澤，有利于進一步繼代培養(yǎng)。 在誘導擬原球莖的分化培養(yǎng)中，單獨使用NAA時，以0.5 mg/L效果最好。如果把NAA與細胞分裂素配合使用，以0.5mg/L NAA+0.5mg/L6-BA的組合最有利于擬原球莖的分化，并且擬原球莖生長量明顯大于單獨使用NAA時的生長量。高濃度NAA和高濃度的6-BA配合使用則會對擬原球莖的分化產生抑制作用。 在試管苗壯苗生根培養(yǎng)中，單獨使用IBA時，以1.0 mg/L效果最好。如

4、果把IBA與NAA配合使用，以0.3mg/L NAA+1.0mg/L6-BA的組合最有利于試管苗的壯苗和生根。 3．擬原球莖誘導和增殖pH值以5.8比較適宜；培養(yǎng)過程中的光照條件以12h光照加12h黑暗有利于擬原球莖誘導和增殖；接種時將長度為0.7cm的莖段橫放時誘導效果最好。 4．碳源對比表明，分析純的蔗糖比葡萄糖和市售普通白糖更有利于擬原球莖誘導和增殖。當蔗糖濃度為40mg/L時不僅有利于擬原球莖的增長，也有利于石斛

5、多糖的積累。 5．系統(tǒng)研究了B<,5>培養(yǎng)基中大量元素、微量元素、蔗糖濃度對鐵皮石斛試管苗壯苗生根及次生代謝產物積累的影響。實驗證明：增加培養(yǎng)基中KNO<,3>、（NH<,4>）<,2>SO<,4>、ZnSO<,4>和FeSO<,4>的含量有利于擬原球莖生長，而不利于石斛多糖和總生物堿的積累；MgSO<,4>對細胞的生長和石斛多糖、生物堿的積累均起抑制作用；增加培養(yǎng)基中NaH<,2>PO<,4>、CaCl<,2>的濃度不僅有利于