1、研究目的：通過觀察冷循環(huán)射頻毀損治療肝癌前后肝癌細胞凋亡的組織病理學特征性的改變，分析肝癌細胞凋亡相關基因在冷循環(huán)射頻毀損治療肝癌前后的表達及相應凋亡參數(shù)的改變，研究冷循環(huán)射頻治療肝癌與肝癌細胞凋亡相關基因表達的關系，評價冷循環(huán)射頻毀損治療肝癌促進細胞凋亡的臨床意義。 方法：應用美國的Cool-tipTMRFablationsystem型冷循環(huán)射頻治療系統(tǒng)，對來我院就診的符合納入研究標準的20名肝癌患者進行術中射頻治療，分別于治

2、療前后采取患者肝臟腫瘤組織進行病理活檢，采用免疫組化的方法定性地測定肝癌細胞凋亡相關基因的表達并用TUNEL方法和IOD法分別定量地測定細胞凋亡指數(shù)和細胞凋亡蛋白表達量，觀察治療前后肝癌細胞凋亡的變化情況。本研究將患者分為治療前組和治療后組，選取正常人群肝臟組織作為對照組，對三組資料進行臨床對照研究，并用非參數(shù)的成組和配對秩和檢驗及成組卡方檢驗進行統(tǒng)計學分析，對細胞凋亡蛋白表達量與實際發(fā)生的細胞凋亡間的關系進行相關分析。探討冷循環(huán)射頻治

3、療肝癌與肝癌細胞凋亡之間的關系以及在引起細胞凋亡的蛋白表達和凋亡發(fā)生方面的作用和意義。 結果：本研究中的細胞凋亡相關基因在正常組與治療前后組中均有表達，在陽性表達率方面無顯著性差異。肝臟腫瘤發(fā)生時，IOD顯示肝癌組織中癌基因bcl-2在腫瘤中的表達增強，抑制細胞凋亡；其余凋亡相關基因的表達在正常肝組織與腫瘤組織中的差異不明顯。經過冷循環(huán)射頻治療后，與正常組比較，高溫凝固壞死區(qū)周邊腫瘤細胞中p53、nm23、caspase3的表達

4、增強，促進細胞凋亡作用增加。與治療前組比較，bcl-2在治療后的蛋白表達量降低，而Bax、p16、p53、nm23、caspase3、c-myc在治療后的蛋白表達量比治療前增加，促進凋亡作用增強。在TUNEL法測定的細胞凋亡方面，治療后組發(fā)生的細胞凋亡數(shù)比治療前組和正常組均有增加。IOD法測定的細胞凋亡蛋白表達量與TUNEL法測定的細胞凋亡發(fā)生數(shù)間沒有相關性。凋亡基因表達強弱程度不能成比例地引起相應的細胞發(fā)生凋亡。 結論：冷循環(huán)