1、目的：本課題旨在研究糖基化人血小板冷藏保存后的體內(nèi)外功能變化，從而尋求一種簡便有效的人血小板4℃冷藏保存方法。 方法：取人血小板，按常規(guī)方法制備濃縮血小板懸液（PCs），懸液中添加終濃度為1．5mM的尿嘧啶二磷酸半乳糖（UDP-Gal），于37℃孵育60min后，放4℃冰箱保存：（1）在保存10d時(shí)取樣檢測血小板數(shù)量（PLT）、血小板平均體積（MPV）、血小板體積分布寬度（PDW）、膜表面CD62p表達(dá)率和膜AnnexinV結(jié)合

2、率。（2）在保存10d時(shí)，取樣并將樣品離心濃縮10倍，用1ml胰島素注射器吸取0．1ml濃縮后的血小板樣品，經(jīng)尾靜脈注射到SCID小鼠體內(nèi)（注入血小板數(shù)為1×109左右），在注射后30min、2h、4h、6h、8h分別從尾尖采血30μl，用肝素抗凝，將小鼠血加CD61-PE標(biāo)記后，用流式細(xì)胞術(shù)計(jì)數(shù)小鼠血中的人血小板，以30min時(shí)的人血小板計(jì)數(shù)為100％，計(jì)算不同時(shí)間的人血小板在小鼠血中的存活率。 結(jié)果： （1）保存10

3、d時(shí)，冷藏糖基化組的PLT、MPV、PDW均無顯著性變化；常規(guī)方法（22℃）保存組的PLT降低、MPV及PDW增大；冷藏對照組的PLT降低、MPV及PDW減??；CD62p表達(dá)率和AnnexinV結(jié)合率在三組中均明顯增高，但冷藏糖基化組明顯低于冷藏對照組和常規(guī)方法保存組。 （2）冷藏糖基化組、冷藏對照組、新鮮對照組在輸入SCID小鼠體內(nèi)后2h、4h、6h、8h的血小板生存率（％）分別為69．2±7．7、65．4±8．0、48．3±

4、7．3、25．8±6．5；20．5±3．3、10．0±2．6、5．8±1．4、2．1±0．5；70．6±10．5、68．9±8．5、47．9±5．8、28．4±5．7。冷藏糖基化組在各時(shí)間點(diǎn)的血小板生存率與新鮮血小板相比無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；而冷藏糖基化組和新鮮血小板對照組在各時(shí)間點(diǎn)的生存率均高于冷藏對照組。 結(jié)論：人血小板懸液加入尿嘧啶二磷酸半乳糖（UDP-Gal），放37℃預(yù)溫60min后（糖基化處理），放4℃冷藏保存后的體內(nèi)外功能