1、目的:研究腹腔注射谷氨酰胺對大鼠視網(wǎng)膜興奮性損傷中Brn3a表達(dá)的影響。
　　 方法:健康清潔型Wistar大鼠55只隨機(jī)分為三組，正常對照組5只，實驗對照組25只、實驗組25只。正常對照組不做任何處理，實驗對照組和實驗組中所有大鼠玻璃體腔注射2μl80mmol/1 NMDA制作視網(wǎng)膜興奮性損傷模型，實驗組在大鼠視網(wǎng)膜興奮性損傷模型制作7h后腹腔注射谷氨酰胺(0.75 g/kg)。實驗組及實驗對照組分別在造模后8h、12h、16

2、h、24h、48h各隨機(jī)處死5只大鼠，正常對照組大鼠在不同時間點隨機(jī)處死一只。HE染色光鏡下觀察各組視網(wǎng)膜組織的形態(tài)學(xué)變化，免疫組織化學(xué)染色及實時熒光定量RT-PCR方法檢測視網(wǎng)膜Brn3a表達(dá)的變化。
　　 結(jié)果:HE染色顯示正常對照組大鼠視網(wǎng)膜組織結(jié)構(gòu)層次清楚，染色均勻，細(xì)胞形態(tài)規(guī)則。實驗各組大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞排列紊亂，胞漿內(nèi)空泡樣變性，視網(wǎng)膜組織變薄，隨時間延長神經(jīng)節(jié)細(xì)胞數(shù)目逐漸減少。實時熒光定量RT-PCR結(jié)果顯示實驗

3、各組Brn3a mRNA均較正常組減少;造模后12h、16h、24h、48h，實驗組Brn3a mRNA均高于實驗對照組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義;造模后8h，實驗組與實驗對照組Brn3a mRNA差異無統(tǒng)計學(xué)意義。免疫組織化學(xué)染色結(jié)果顯示Brn3a只在視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層表達(dá)，陽性細(xì)胞計數(shù)及光密度值測定結(jié)果與實時熒光定量PCR結(jié)果相吻合。
　　 結(jié)論:1.成功建立大鼠視網(wǎng)膜興奮性損傷模型;
　　 2.NMDA可致大鼠視網(wǎng)膜中B