1、中國醫(yī)科大學碩士學位論文外源性GM1對癲癇大鼠NGF在海馬和大腦皮層表達的影響姓名：張強申請學位級別：碩士專業(yè)：神經病學指導教師：何志義20000401鼠首先于lo％水合氯醛腹腔麻醉(100mg／kg)，開胸、暴露心臟，給予左心室插管，肝素化生理鹽水250mi沖洗后，分兩步進行：免疫組化標本制備，予4％多聚甲醛磷酸鹽緩沖液(pH74)250mi左心室灌注，斷頭，取腦，按Paxious大鼠腦立體定位圖制成有海馬(含CAl區(qū))及相應大腦皮層

2、的標本、充分固定，常規(guī)脫水。侵蠟，制成7pm厚切片。采用鏈霉素一親生物素過氧化物酶法(SABC法)，用免疫組化方法檢測NGF在海馬和大腦皮層神經細胞表達情況。電鏡標本制備，予25％戊二醛磷酸鹽緩沖液(PH74)250mi左心室貫注后，斷頭，取腦，制成有海馬(含CAl區(qū))及相應大腦皮層標本，鋨酸后固定，常規(guī)脫水，環(huán)氧樹脂812包埋，超薄切片機切片，醋酸鈾、檸檬酸鉛雙重染色，用透射電鏡觀察拍片。結果癲癇判定標準。I級，面肌抽搐出現(xiàn)咀嚼運動；

3、Ⅱ級，頸部肌肉抽搐出現(xiàn)點頭運動；置級，一側前肢陣攣；Ⅳ級，雙側前肢陣攣；V級，雙側前肢陣攣，失去平衡跌倒。A、B兩組大鼠無癲癇發(fā)作，c、D兩組大鼠均有l(wèi)—V級癲癇發(fā)作。通過電鏡觀察：A、B兩組大鼠神經細胞結構完好，核仁清晰，染色質均勻分布，線粒體結構完整。C組神經細胞明顯水腫，核仁模糊，染色質聚集，線粒體腫脹。D組神經細胞受損程度明顯輕于C組。免疫組化染色結果顯示：癲痛鼠神經細胞NGF表達高于未致痛鼠(P005)。在癲癇鼠中GMl干預鼠