1、背景：
　　 急性早幼粒細胞性白血病(acute promyelocytic leukemia，APL)約占急性非淋巴系白血病的8-15％。在體外全反式維甲酸(all trans retinoicacid，ATRA)誘導HL60，U937和原代APL發(fā)生終末分化的實驗結果基礎上，我國學者1986年首次用ATRA治療APL，并獲得成功。在體外實驗的基礎上，三氧化二砷(arsenic trioxide，As2O3)被用以治療APL患

2、者，亦獲得成功。
　　 細胞間粘附分子-1(intercellular adhesion molecuarl，ICAM-1或CD54)屬于免疫球蛋白超家族成員，是淋巴細胞相關抗原-1((LFA-1)的主要配體。作為白細胞分化抗原，ICAM-1是細胞黏附、遷移及提呈抗原的重要介導分子，參與細胞的信號轉(zhuǎn)導與活化、細胞的伸展和移動、細胞的生長以及分化、炎癥、血栓形成、腫瘤轉(zhuǎn)移、創(chuàng)傷愈合等一系列重要生理和病理過程。在各種因素作用下，IC

3、AM-1的細胞膜外部分可脫落進入血循環(huán)，成為可溶性形式(Soluble ICAM-1，sICAM-1)。sICAM-1相對分子質(zhì)量為82×103，仍具有結合配體LFA-1的活性，從而與多種病理生理過程有關，如腫瘤進展及免疫抑制。癌癥患者血清sICAM-1水平升高與腫瘤侵犯有關，初治、治療后未緩解及復發(fā)性ALL和AML患者的血清sICAM-1水平明顯高于健康人，對臨床診斷有一定價值。另外高水平sICAM-1及VCAM-1均與血白細胞數(shù)顯著

4、相關，sICAM-1還可影響NK細胞的活力，并可通過抑制ICAM-1/LFA-1系統(tǒng)而阻遏免疫反應。
　　 關于血管細胞粘附分子-1(vascular cell adhesion molecule-1，VCAM-1或CD106)的報道較少，已知培養(yǎng)的活化內(nèi)皮細胞、人的血清、類風濕病人滑膜液中可以檢測到sVCAM-1。sVCAM-1可以通過結合其配體抑制白細胞向組織的移動，同時還是配體結合的競爭抑制劑。
　　 ICAM-1

5、和VCAM-1作為監(jiān)測急性白血病的早期復發(fā)、髓外浸潤和判斷預后的指標已得到證實。探討VCMA和ICMA在APL發(fā)生、發(fā)展和緩解中的作用，并進一步明確APL患者誘導分化治療前后粘附分子ICAM-1和VCAM-1變化的臨床意義將有助于為治療難治性、復發(fā)性白血病開辟新途徑。
　　 目的：
　　 檢測白血病患者As2O3治療前后白細胞數(shù)量和種類變化，闡明粘附分子sICAM-1和sVCAM-1的表達、分泌變化規(guī)律，以及As2O3體

6、外誘導后，APL原代細胞分泌sICAM-1和sVCAM-1的水平變化，并檢測As2O3治療前后粘附分子ICAM-1和VCAM-1的mRNA表達情況，預期揭示粘附分子sICAM-1和sVCAM-1與白血病之間的關系以及檢測粘附分子sICAM-1和sVCAM-1的分泌水平在白血病診斷、治療及預后監(jiān)測中的臨床意義。
　　 方法：
　　 采用RT-PCR檢測PML/RARα融合基因類型；常規(guī)細胞計數(shù)檢測治療前后APL患者外周血白

7、細胞數(shù)量和分類變化；采用ELISA法檢測治療前后APL患者外周血粘附分子sICAM-1和sVCAM-1的變化；采用ELISA法檢測As2O3對原代APL細胞分泌sICAM-1和sVCAM-1的影響；采用流式細胞術檢測As2O3治療前后白血病細胞表面粘附分子CD11b，CD54和CD106的表達；采用甲基纖維素半固體培養(yǎng)法檢測As2O3對L-CFU集落的影響：通過RT-PCR檢測As2O3治療前后APL患者ICAM-1和VCAM-1mRN

8、A表達變化；采用MTT法檢測0．5μmol/L的As2O3作用后對APL細胞體外增殖的影響。
　　 結果：
　　 1．經(jīng)RT-PCR檢測，患者APL細胞擴增出長型(L-type)和短型(S-type)PML/PAR a融合基因。
　　 2．三氧化二砷一般在7～10天內(nèi)誘導明顯的外周血白細胞升高，平均第15天達到高峰，早幼粒比例下降，細胞分類以中幼粒樣細胞為主，較成熟粒細胞比例上升，白細胞升高持續(xù)12～15天，隨后

9、逐漸降低，緩解后恢復到正常水平。
　　 3．ELISA檢測結果表明，治療前APL患者血清中sICAM-1水平顯著高于對照組，治療后5-13天血清sICAM-1水平升高，第7天達到最高，此后逐漸下降，30天時接近正常水平。APL患者血清中粘附分子sVCAM-1水平明顯高于正常對照組，而治療后第7天達到最高，7-13天血清sVCAM-1水平高于治療前。治療13天后逐漸下降，30天后接近正常水平。As2O3對正常單個核細胞的粘附分子s

10、ICAM-1和sVCAM-1無明顯影響，對原代APL細胞分泌粘附分子sICAM-1和sVCAM-1影響不同，應用As2O3后，原代APL細胞分泌粘附分子sICAM-1的水平升高不明顯，但sVCAM-1的分泌水平顯著升高。
　　 4．流式細胞儀測定結果表明APL細胞經(jīng)過As2O3誘導后，粘附分子CD11b、CD54和CD106明顯升高，并且藥物達到高峰期后，粘附分子CD11b、CD54和CD106的表達也達到高峰。
　　

11、5．L-CFU隨著誘導分化治療呈現(xiàn)逐漸下降趨勢，緩解后L-CFU細胞幾乎不生長，僅有少量集落形成。
　　 6．治療前sVCAM-1和sICAM-1的基因表達水平較低，治療后sVCAM-1和sICAM-1的基因表達均增強，并且隨著治療時間的延長，表達量上調(diào)。
　　 7．As2O3在體外能顯著抑制APL原代細胞的增殖，并且隨著作用時間延長，抑制率升高。
　　 結論：
　　 三氧化二砷可誘導APL細胞由早幼粒細