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文檔簡介
1、本試驗對鵝催乳素受體基因(PRLR)部分序列進行了克隆和表達,分別獲得一個606bp的片斷和500 bp的片斷,并且在鵝不同組織中進行表達,從而為研究禽類抱性分子機理提供理論依據(jù)。 性成熟后的洪澤湖鵝屠宰后取腎、肝、睪丸、輸精管、卵巢、脾、大腸、心,提取總RNA,從總RNA中分離mRNA,(1)對PRLR基因編碼區(qū)部分(EST)的克隆,克隆到了一個606 bp的鵝催乳素受體基因的片段,通過與雞催乳素受體序列比對分析表明,此片段位
2、于閱讀框(open reading frame,ORF)內(nèi),含催乳素受體部分外顯孚9(148 bp),外顯子10(179 bp),外顯子11(145 bp),外顯于12(100 bp),部分外顯子13(43 bp)。PRLR片段(EST)的同源擴增產(chǎn)物(606bp)與雞催乳素受體基因序列分析,經(jīng)過比較,發(fā)現(xiàn)兩者蛋白質(zhì)與氨基酸序列分別基本相同,說明本試驗擴增的確實是鵝的基因序列,而不是其他動物的基因序列。(2)以5’RACE產(chǎn)物作為模板,
3、采用5’RACE-PCR技術(shù),我們得到了一個500 bp的片段,測序結(jié)果與雞的序列比對表明,這一片段含239 bp的第1外顯子,69 bp的第2外顯子,114 bp的第3外顯子及81 bp的第4外顯子(部分),5’UTR區(qū)跨第l、2、3外顯子及部分第4外顯子。序列比對發(fā)現(xiàn),外顯子1與報道的雞PRLR第1外顯子無法配對;外顯子2、3可以配對。同時根據(jù)擴增的EST與5’端序列分析中發(fā)現(xiàn),編碼區(qū)在進化上相對保守,而5’-UTR相對不保守。根據(jù)
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