1、本研究調(diào)查醫(yī)學院校成人學生、醫(yī)務人員乙肝疫苗免疫接種現(xiàn)狀，對乙肝疫苗接種后無(弱)應答的成人采用三種不同方案進行再免疫：復種(仍使用原標準劑量)、增加疫苗劑量、聯(lián)合粒細胞一巨噬細胞集落刺激因子(GM—CSF)，探索行之有效的乙肝疫苗再免疫方法，同時研究乙肝疫苗無(弱)應答者相關的免疫機制，為制訂相應策略提供一定的科學依據(jù)。全文分為3個部分。 第1章：成人學生、醫(yī)務人員乙型肝炎病毒感染及乙肝疫苗接種情況調(diào)查 第2章：成人乙

2、肝疫苗無(弱)應答者三種不同方案再免疫效采研究 第3章：SLAM(CDl50)在成人乙肝疫苗無(弱)應答者體外PBMCs中的表達研究 第1章 成人學生、醫(yī)務人員乙型肝炎病毒感染及乙肝疫苗接種情況調(diào)查 第1節(jié) 成人學生乙型肝炎病毒感染及乙肝疫苗接種情況 方法: 無菌采集無(弱)應答者與應答者肝素鈉抗凝靜脈血18ml，4小時內(nèi)送至實驗室，采用淋巴細胞分離液密度梯度離心分離法，用PBS 1：1體積

3、對倍稀釋；緩緩將細胞懸液加到5ml的淋巴細胞分離液的液面上；離心(700 g／min)20min，用毛細吸管輕輕抽取出位于血漿與分離液界面層呈自膜狀的PBMCs，用無菌PBS液反復洗PBMC，離心去上清。其中1支管中細胞懸液，直接對細胞表面抗原進行染色標記，上流式細胞儀測定細胞膜表面分子CD150,另2支管細胞懸液，接種子平底細胞培養(yǎng)板中。 結論: 1.男性學生較女性學生更易成為乙型肝炎病毒的易感人群，是乙肝疫苗接種的重

4、要群體。 2.隨著年齡的增加，乙肝疫苗接種效果(HBsAb陽性率)逐漸降低；需要接種乙肝疫苗者則隨著年齡的增加而增多。 3.加強學生的乙肝疫苗接種工作對乙型肝炎的防治措施仍屬必要。對接種年限大于3年者，可進行抗-HBs監(jiān)測，及時進行加強免疫。 對接種乙肝疫苗后無(弱)應答的成人，復種(仍使用原標準劑量)、增加疫苗劑量和聯(lián)合粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子(GM-CSF)三種方案再免疫均可提高部分無(弱)應答者的抗-H

5、Bs應答率，而增加疫苗劑量組和聯(lián)合GM—CSF組方案免疫效果(抗-HBs陽轉(zhuǎn)率和抗體免疫水平)均優(yōu)于單純復種組，但仍不能完全消除無應答狀態(tài)。是否應加大劑量繼續(xù)免疫，有待進一步臨床研究。 1研究對象的篩選對上述(第2章)既往兩年曾行乙肝疫苗接種、乙肝兩對半檢測均陰性的成年人接受標準程序(0，1，6月)再免疫后，于再接種后第7～12月檢測抗HBs滴度(IMx，AUSAB試劑盒)。 方法: 無菌采集無(弱)應答者與應答

6、者肝素鈉抗凝靜脈血18ml，4小時內(nèi)送至實驗室，采用淋巴細胞分離液密度梯度離心分離法，用PBS 1：1體積對倍稀釋；緩緩將細胞懸液加到5ml的淋巴細胞分離液的液面上；離心(700g／min)20min，用毛細吸管輕輕抽取出位于血漿與分離液界面層呈自膜狀的PBMCs，用無菌PBS液反復洗PBMC，離心去上清。其中1支管中細胞懸液，直接對細胞表面抗原進行染色標記，上流式細胞儀測定細胞膜表面分子CD150,另2支管細胞懸液，接種子平底細胞培養(yǎng)