1、山東大學碩士學位論文降鈣素和反義核酸抑制乳腺癌細胞的體內(nèi)外作用研究姓名：趙麗申請學位級別：碩士專業(yè)：免疫學指導教師：曹英林2002.5.16山東大學碩士學位論文一========================_h1R的aoDN在體外作用于乳腺癌細胞系McF7和肝癌細胞系BEL7402，觀察其對細胞生長、端粒酶活性、凋亡及細胞周期的影響，研究端粒酶反義、|核酸的抑癌作用。，，目的：體外實驗研究sCT的抑癌機理。建立乳腺癌荷瘤裸鼠模型，觀

2、察sCT的體內(nèi)抑癌作用和對骨代謝的影響。研究端粒酶反義核酸的抑癌作用，探索aODN發(fā)揮作用的理想構型和濃度，觀察端粒酶與凋亡的關系。f方法：Ii1降鈣素體外抑癌作用的研究：體外培養(yǎng)人乳腺癌細胞系T47D和MCF07，細胞計數(shù)、MTT法觀察細胞生長抑制率；提取細胞內(nèi)RNA，透射電鏡(Wansmissionelectronmicroscope，TEM)和DNA電泳觀察細胞凋亡，流式細胞儀比較細胞周期和凋亡率改變，以RTPCR和ELISA法分

3、析細胞端粒酶活眭。2降鈣素體內(nèi)抑癌作用的研究；選擇6周齡的雌性裸鼠，皮下接種乳腺癌細胞系MCF7細胞。因為乳腺癌細胞系為雌激素依賴性生長，給裸鼠肌注雌激素并在同—部位兩次接種以提高成瘤率，建立乳腺癌荷瘤動物模型。隔日肌注不同劑量的sCT(004p_g、0299、l瞻)，對照組注射等體積注射用水。20d后分離瘤體測Jl中Nk4，測血鈣和血清堿性磷酸酶水平。掃描電鏡(scanningelectronmicroscope，SEM)觀察裸鼠第三