1、目的：Dysferlinopathy是由于dysferlin基因突變導致的一組以進行性肌無力為特征的遺傳性肌病。Dysferlin是骨骼肌上的一種與肌細胞膜自身修復有關的跨膜蛋白。Dysferlin基因的突變類型多樣復雜，無明顯突變熱點，因此個體間存在表型異質性。目前發(fā)現dysferlinopathy有三種臨床表現型：肢帶型肌營養(yǎng)不良2B(1imb-girdle muscular dystrophy 2B；LGMD2B)、Myoshi型

2、肌營養(yǎng)不良(Miyoshi musculardystrophy；MMD)和脛骨前群肌病(Distal anteriorcompartment myopathy)。它們具有共同骨骼肌病理表現：不同程度肌細胞變性、壞死、再生，炎性細胞浸潤。分子病理：抗-dysferlin單克隆抗體免疫組織化學染色，dysferlin蛋白在肌細胞膜完全缺失。 LGMD2B和多發(fā)性肌炎(polymyositis，PM)的臨床和組織病理學表現具有一定的相

3、似性，有時很難鑒別，dysferlin單克隆抗體免疫組化染色是鑒別的關鍵。 本研究探討dysferlin蛋白的功能及與相關蛋白的關系；Dysferlinopathy的炎性反應機制及與炎性肌病的關系。提高分子病理學診斷dysferlinopathy的意識，對于診斷、鑒別診斷困難病例應積極行免疫組織化學染色病理診斷，并探討治療方法。 方法：根據抗-dysferlin單克隆抗體免疫組織化學染色，肌細胞膜dysferlin蛋白完

4、全缺失患者8例入選病例組，根據最初受累病變部位不同進行分型診斷，下肢近端肌群最先受累患者診為LGMD2B；下肢遠端后群肌，主要是腓腸肌最先受累患者診為MMD；最先受累肌群為下肢遠端前群肌的為Distal anterior compartment myopathy。對照組為炎性肌病患者，包括多發(fā)性肌炎7例、皮肌炎2例、包涵體肌炎1例，均根據國際診斷標準確診。兩組患者骨骼肌標本同時進行抗-CD4<'+>T細胞、CD8<'+>T細胞、MHC-

5、1分子單克隆抗體免疫組織化學染色，光鏡下觀察浸潤炎性細胞的類型、分布特點，并進行定量分析，兩樣本t檢驗處理數據。觀察MHC-I陽性肌細胞分布特點、程度及與炎性細胞分布的關系。對比兩組，探討dysferlinopathy炎性反應機制，提出診斷和鑒別診斷意義，探討有效治療。 結果： 1 病例組入選8名患者，其中LGMD283例；MMD5例，無Distal anterior compartment myopathy。平均發(fā)病年

6、齡在16-46歲，病程5-16年不等。1例有陽性家族史。所有dysferlinopathy患者的肌酸激酶水平均增高，數值變化在2283-11000U/L。肌電圖：LGMD2B均為肌源性改變；MMD中2例早期可見神經源性改變，晚期呈現肌源性改變，其余3例呈肌源性改變。 骨骼肌組織化學染色病理分析：病例組所有患者均呈肌營養(yǎng)不良改變：不同程度肌細胞變性、壞死和再生。炎性反應活躍(酸性磷酸酶染色)，其中2例多數肌細胞已被脂肪組織取代，炎

7、性反應不明顯。對照組：PM肌細胞變性壞死明顯，部分呈灶性分布，大量炎性細胞浸潤；DM可見束周萎縮，壞死細胞和炎性細胞主要分布在束周萎縮纖維和血管周圍。 IBM可見邊緣空泡，剛果紅染色可見淀粉樣物質沉積。 分子病理：抗-dysferlin單克隆免疫組織化學染色，病例組骨骼肌細胞膜dysferlin蛋白完全缺失，對照組dysferlin蛋白表達正常。 2 病例組和對照組抗-CD4<'+>T細胞、CD8<'+>T細胞、

8、MHC-1分子單克隆抗體免疫組織化學染色，病理分析。隨機觀察3個不同視野，病例組患者幾乎均未見CD8<'+>T細胞表達，少量CD4<'+>T細胞表達，分布在細胞外基質、血管周圍和變性、壞死肌細胞內。對照組PM和IBM主要是CD8<'+>T細胞表達，分布在肌內膜、變性壞死肌細胞內和血管周圍；DM主要是CD4<'+>T細胞表達，主要分布在束周萎縮纖維和血管周圍。Dysferlinopathy的T細胞、CD8<'+>T細胞計數，明顯少于PM，

9、兩樣本t檢驗分析數據，P<0.05，有統(tǒng)計學意義。 兩組患者均呈現MHC-I分子在骨骼肌細胞膜增強表達。Dysferlinopathy患者中5例僅在血管周圍、變性和壞死肌細胞膜表達，其余3例同時在形態(tài)正常肌細胞膜表達，8例表達MHC-1陽性肌細胞占相同視野肌細胞總數的比值均<25％，其周圍多有炎性細胞積聚，有的呈灶性分布。對照組MHC-I陽性表達分布：PM和IBM多分布在形態(tài)正常、變性壞死肌細胞膜和血管周圍：DM多分布在束周萎縮

10、肌細胞膜和血管周圍，陽性表達比例最低在50％-75％。 結論： 1 肌細胞變性壞死是Dysferlinopathy的組織病理學特征之一，與多發(fā)性肌炎相似，難以鑒別。 2 Dysferlinopathy主要浸潤的炎性細胞不是T細胞，幾乎未見CD8+T細胞浸潤；骨骼肌細胞表面上調表達MHC-I，表達程度不如炎性肌病明顯。 3 Dysferlin蛋白缺失，是dysferlinopathy肌細胞變性壞死的關鍵因素