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文檔簡介
1、盾殼霉(Coniothyrium minitans)是一種能寄生核盤菌(Sclerotinia sclerotiorum)菌絲和菌核的重寄生真菌,可用于菌核病的生物防治。盾殼霉菌株ZS-1的T-DNA插入突變體庫在前期研究中已構建,本研究以其中一個產(chǎn)黑色素缺陷型突變體ZS-1TN24363為材料進行了深入研究,主要結果如下:
1.通過hiTAIL-PCR克隆到了T-DNA插入位點處的側翼序列,比對分析發(fā)現(xiàn)T-DNA插入破壞了一
2、個可能的基因。該基因全長3167 bp,預測含有3個外顯子,2個內(nèi)含子,編碼一個含1011個氨基酸的蛋白。該蛋白N端含有一個Zn-clus和Med3的保守結構域,C端含有一個fungal-TF-MHR的保守結構域。進化樹分析發(fā)現(xiàn)該蛋白與Clohesyomyces aquaticus的轉錄因子Cmr1蛋白相似性最高,故將該基因命名為CmMR1。
2.利用基因敲除技術獲得了3個CmMR1基因敲除轉化子。敲除轉化子和突變體ZS-1T
3、N24363的菌落形態(tài)相似,菌落顯橙色無黑色素沉積,可產(chǎn)生無色透明的分生孢子器和分生孢子。CmMR1基因互補可使敲除轉化子恢復產(chǎn)黑色素表型?;駽mMR1對菌株的生長速率、產(chǎn)孢量、生物學產(chǎn)量、寄生核盤菌菌絲菌和核的能力、對高滲的耐受性等均無明顯影響,但CmMR1的敲除使菌絲中ROS含量增多,抗紫外線能力減弱。
3.基因CmMR1的敲除使黑色素合成酶基因Cm4HNR、CmSCD、Cm3HNR、CmLAC的表達量下調(diào),證明CmMR
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