1、大麗輪枝菌(VerticilliumdahliaeKleb.)引起的棉花黃萎病是世界范圍內(nèi)分布最廣、危害最重的病害之一。由于大麗輪枝菌實(shí)驗(yàn)室條件下培養(yǎng)生長周期長,功能基因組的復(fù)雜程度高,長期以來該病菌功能基因組的研究相對(duì)滯后,使得致病機(jī)理一直沒有得到闡明。在病害循環(huán)過程中黑色素化的微菌核是該病害主要的初侵染來源,病原菌在生長過程中產(chǎn)生的黑色素在致病性方面起重要作用。通過分析已報(bào)道的黑色素合成途徑中的相關(guān)基因序列設(shè)計(jì)兼并引物以新疆棉花黃萎

2、菌強(qiáng)致病力菌株V592為材料,通過PCR、克隆和測(cè)序,獲得真菌DHN黑色素合成途徑中的一個(gè)關(guān)鍵酶—聚酮合成酶(PKS)基因的全序列,為6742bp(登錄號(hào):KC422576)。序列分析顯示,該基因由4個(gè)外顯子和3個(gè)內(nèi)含子組成,其開放閱讀框(ORF)編碼2189個(gè)氨基酸;具有I型聚酮合成酶(PKSI)基因的結(jié)構(gòu)特征:含有1個(gè)酮基合成酶(KS)結(jié)構(gòu)域,2個(gè)?；d體蛋白(ACP)結(jié)構(gòu)域,1個(gè)酰基轉(zhuǎn)移酶(AT)結(jié)構(gòu)域,2個(gè)磷酸泛酰巰基乙胺結(jié)合位

3、點(diǎn)(PP)結(jié)構(gòu)域,1個(gè)硫酸酯酶(TE)結(jié)構(gòu)域。以KS編碼氨基酸序列構(gòu)建系統(tǒng)關(guān)系樹,結(jié)果表明產(chǎn)生相同多聚酮次生代謝物質(zhì)的真菌具有相同的進(jìn)化來源,V592與產(chǎn)生黑色素(melanin)的其他真菌處于相同的進(jìn)化分支上,而產(chǎn)生其他次生代謝產(chǎn)物的真菌則分別形成不同的進(jìn)化分支,因此推測(cè)棉花黃萎菌PKS基因與黑色素的產(chǎn)生相關(guān)。
　　同時(shí)通過ATMT的方法篩選1144個(gè)突變體得到了91個(gè)不產(chǎn)生黑色素的白化體,熒光檢測(cè)結(jié)果顯示陽性率為87.9％。選