棉花黃萎病菌毒素誘導擬南芥幼苗差異表達基因的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、本研究以模式植物擬南芥為材料,利用mRNA差異顯示技術分離出棉花黃萎病菌毒素(VD-toxin)誘導C型擬南芥幼苗差異表達基因(DD1-DD4),并通過熒光定量PCR技術,著重研究了差異表達基因DD1和DD2在C型擬南芥(對Verticilliumdahliae敏感)和C24型擬南芥(對Verticilliumdahliae耐性)幼苗與VD-toxin互作反應的早期的不同變化,以期揭示擬南芥抗VD-toxin作用的分子機制。 主

2、要結果如下:通過mRNA差異顯示方法分析了擬南芥幼苗在附含150μg/mLVD-toxin的MS培養(yǎng)基上誘導前后基因表達的差異。通過鑒定,從35條差異片斷中最終得到了4條陽性片斷DD1、DD2、DD3、DD4。其中DD1、DD3、DD4在受到VD-toxin誘導后與對照相比表達增強,而DD2在受到VD-toxin誘導后表達下降。經(jīng)序列比對分析表明,DD1與擬南芥可能的組蛋白H2B基因AT3G09480具有99%的相似性,推測其在毒素處理

3、后的不同時期的表達變化,可能影響植物的細胞分裂活性和生長,并在轉錄水平激發(fā)植物的防御反應;此外,該基因產物可能在防御反應中也具有類似在動物中的抵抗毒素的作用;DD2全長屬于pumilioMPT5基因家族,此家族的蛋白產物是多拷貝的翻譯的抑制物。在VD-toxin誘導的0-48h期間,DD2在C型與C24型擬南芥幼苗中的表達呈現(xiàn)完全不同的變化趨勢,推測DD2可能受到VD-toxin信號的調節(jié),其產物對mRNA活性、定位及穩(wěn)定性具有不同的調

4、控作用,并對翻譯過程的負調控作用將最終影響細胞分裂;DD3是擬南芥線粒體基因組的一片斷,推測DD3的表達變化與活性氧和NO信號分子所參與調控的植物體內的防御反應有密切關系;DD4與擬南芥的BACT5I8的部分序列具有98%的相似性,基因分子量較大,目前功能又未知,因此進一步研究較困難。以上各基因的全序列雖然已知,但有關其確切功能的研究尚未有報道,從本實驗初步得到的結果分析,它們可能在擬南芥對VD-toxin的防御反應中的不同方面于轉錄水

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