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文檔簡介
1、蠟梅科(Calycanthaceae)植物屬于被子植物門(Angiospermae)雙子葉植物綱(Dicotyledoneae)原始花被亞綱(Archichlamydeae)毛茛目(Ranales),包含多種著名的觀賞植物。特別是該科植物——蠟梅(Chimonanthus praecox),因其在寒冷少花的冬季綻放而格外著名。到目前為止,有關基因組大小方面的研究尚未公開報道。因此,本文利用流式細胞術預測蠟梅科基因組大小,為該科基因組學方
2、面的研究提供參考數(shù)據。同時,本文采用Photoshop圖像處理軟件,分析蠟梅科染色體核型,為探討該科物種的親緣關系提供新的細胞學證據。主要結論如下:
1、蠟梅科細胞核懸浮液制備體系
通過設置Tris·MgCl2、WPB、LB01和Partec商用解離液共4種裂解液,以及不同的實驗材料、裂解液處理時間、內標法與外標法的選擇和染色時間等影響因素的探索實驗。結果發(fā)現(xiàn),用新鮮幼嫩葉片做實驗材料,在解離液WPB中裂解3min,
3、使用50μg/ml的熒光染料DAPI低溫避光染色10min后上機檢測效果最好。該方法具有細胞碎片少、主峰清晰等優(yōu)點。
2、蠟梅科基因組大小測定
本實驗以水稻‘日本晴’(Oryza sativa‘Nipponbare’)及大豆William82(Glycinemax‘William82’)為參照植物,首次將流式細胞儀用于蠟梅科物種的基因組大小測定中。測定結果表明:蠟梅(Chimonanthus praecox)、亮葉蠟
4、梅(Ch.nitens)、柳葉蠟梅(Ch.salicifolius)、西南蠟梅(Ch.campanulatus)、夏蠟梅(Calycanthus chinensis)、美國蠟梅(C.floridus)的基因組大小依次為805.88Mb、673.57Mb、873.58Mb、790.46Mb、838.38Mb、854.79Mb。
3、蠟梅科核型分析
通過使用0.002 mol/L8-羥基喹啉溶液預處理3.5h或者4.0h
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