大鼠骨髓間充質干細胞的培養(yǎng)和轉染及其對腸瘺瘺口的影響.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:腸瘺是一種嚴重的術后并發(fā)癥且死亡率高。主要表現(xiàn)為:瘺口形成與腸內容物漏出、感染、營養(yǎng)不良、水電解質和酸堿平衡紊亂以及多器官功能障礙等。營養(yǎng)支持、抗感染、減少腸液分泌、封堵瘺管、維持內環(huán)境穩(wěn)定、促進瘺管愈合以及選擇性手術治療等綜合措施,可以提高治愈率。血紅素加氧酶-I(HO-1)也稱為熱休克蛋白32,是血紅素降解過程中的限速酶,它可以降解衰老或破損紅細胞釋放出的血紅素,生成膽綠素、膽紅素、一氧化碳(CO)和鐵蛋白。大量事實證明,HO

2、-1在保持細胞穩(wěn)態(tài)方面能起到極其重要的作用,可以減輕由免疫介導、氧化應激、炎性細胞浸潤導致的組織損傷。腺相關病毒(adeno-associated virus,AAV)是安全有效的基因載體,且有外源基因可以長期穩(wěn)定表達,分裂期細胞和靜止期細胞均能被感染等優(yōu)點,還能將基因轉入非周期(noncyling)腫瘤細胞。骨髓間充質干細胞屬于多潛能干細胞,分化潛能更廣,具有自我更新能力及多向分化能力。能在合適的分化條件下不僅可以分化為成骨細胞、脂肪

3、細胞、軟骨細胞、肌肉細胞等中胚層細胞,而且可以分化為外胚層和內胚層的細胞。它成為多種組織修復的種子細胞與基因治療的良好載體。在嚴重的組織缺血和損傷的病例中可觀察到骨髓間充質干細胞遷徙至損傷部位,并分泌生物活性因子,促進修復與再生。骨髓間充質干細胞可以通過骨髓遷徙或體外擴增后直接或全身注射到達損傷部位,抑制疤痕與凋亡,促進血管生成及祖細胞分裂分化,有利于損傷的愈合。本文探討轉染HO-1基因的骨髓間充質干細胞移植對大鼠腸瘺模型的影響。

4、>   方法:骨髓間充質干細胞的分離與培養(yǎng)。骨髓間充質干細胞通過腺相關病毒介導轉染HO-1基因。以Wistar大鼠建立腸瘺模型,實驗動物隨機分為實驗組(術后24小時造瘺口注射1×106個轉染目的基因的骨髓干細胞),,對照組(術后24小時造瘺口注射生理鹽水lOOul)。移植70天后觀察瘺口愈合情況。
   結果:實驗組瘺口愈合明顯快于對照組。
   結論:轉染H0-1基因的骨髓間充質干細胞移植有利于大鼠腸瘺模型瘺口的愈合

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