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1、目的:通過采用RT-PCR法及免疫熒光標(biāo)記.流式細(xì)胞儀檢測(cè)慢性阻塞性病(COPD)患者外周血單個(gè)核細(xì)胞CCR5 mRNA表達(dá)水平及CCR5陽性細(xì)胞的比率,探討趨化因子受體5(CCR5)在慢性阻塞性肺疾病(CO PD)發(fā)病機(jī)制中的作用。 方法:20例健康體檢者(對(duì)照組)和30例慢性阻塞性肺病患者(COPD組)均行肺功能、誘導(dǎo)痰細(xì)胞學(xué)檢查。密度梯度離心法分別分離30例慢性阻塞性肺病患者和20例正常人外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBMC),采用
2、RT-PCR法測(cè)定PBMC在培養(yǎng)前后CCR5 mRNA的表達(dá)水平以及采用免疫熒光標(biāo)記.流式細(xì)胞儀檢測(cè)CCR5的表達(dá)。統(tǒng)計(jì)處理用SPSS10.0統(tǒng)計(jì)軟件,所有數(shù)據(jù)均以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差 (x±s)表示,樣本間均數(shù)的比較采用,檢驗(yàn),變量間的關(guān)系采用Pearson直線相關(guān)分析,P<0.05表示有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)果: (1)COPD組在培養(yǎng)前、后CCR5 mRNA表達(dá)水平分別為778.2±124.4、1047.7±128.3,CC
3、R5陽性細(xì)胞比率分別為10.05±4,54、14.96±6.37;正常組在培養(yǎng)前后CCR5 mRNA表達(dá)水平分別為482.9±70.7、278.4±101.4,CCR5陽性細(xì)胞比率分別為10.05±4.54、14.96±6.37;COPD組培養(yǎng)后的CCR5 mRNA表達(dá)水平及CCR5陽性細(xì)胞比率顯著高于培養(yǎng)前(P<0.01),同時(shí)培養(yǎng)前后的也顯著高于正常對(duì)照組(分別為P<0.05、P<0.01),而在正常對(duì)照組培養(yǎng)后的顯著低于培養(yǎng)前的(
4、P<0.01)。 (2)CO PD患者CCR5陽性細(xì)胞比率與誘導(dǎo)痰中巨噬細(xì)胞數(shù)(AM)呈正相關(guān),相關(guān)系數(shù)為:r<,l>=0.573(P<0.01),與誘導(dǎo)痰中中性粒細(xì)胞數(shù)(PMN)呈弱相關(guān),相關(guān)系數(shù)為:r<,2>=0.265(P<0.05);與FEVl占預(yù)計(jì)值的百分比(FEV1%pre)呈負(fù)相關(guān),相關(guān)系數(shù)為r=-0.417(P<0.01)。 結(jié)論:COPD組CCR5的表達(dá)增高,且與誘導(dǎo)痰中的巨噬細(xì)胞數(shù)(AM)呈正相關(guān)、
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