1、目的:探討骨髓間充質干細胞復合強化磷酸三鈣/富血小板血漿凝膠支架材料體外定向成骨誘導后植入比格犬脛骨上段骨缺損中構建組織工程骨并修復體內骨缺損能力及血管化的情況。 方法:（1）比格犬骨髓間充質干細胞及強化磷酸三鈣/富血小板血漿凝膠復合支架材料的制備，包括BMSCs的分離、純化和擴增，富血小板血漿的制備。（2）比格犬骨髓間充質干細胞復合單純強化磷酸三鈣支架材料及強化磷酸三鈣/富血小板血漿凝膠支架體外培養(yǎng)和誘導1周。（3）細胞復合單

2、純強化磷酸三鈣支架材料復合物、自體髂骨及細胞復合強化磷酸三鈣/富血小板血漿凝膠支架材料復合物隨機植入比格犬雙后肢脛骨平臺下方骨缺損處。觀察植入物的表面變化、骨痂形成、骨缺損修復情況及周圍組織反應。（4）術后4、8、12周取材行HE染色計數(shù)微血管密度（MVD），同時行骨鈣素蛋白免疫組織化學染色觀察其表達情況。（5）RT-PCR檢測體內各組在4、8、12周時OCN、VEGF的mRNA的表達情況，并對兩者的相關性進行分析。 結果:（1

3、）各組材料植入比格犬脛骨骨缺損后，傷口生長良好，沒有全身和局部的炎癥、毒性反應及排斥反應，傷口一期愈合。細胞復合強化磷酸三鈣/富血小板血漿凝膠支架材料組材料降解較快。（2）術后4、8、12周取材行MVD測定細胞復合強化磷酸三鈣/富血小板血漿凝膠支架材料組MVD值與髂骨組接近，高于細胞復合單純材料組。（3）術后4、8、12周取材行骨鈣素蛋白免疫組織化學染色可見各組均可觀察到新生軟骨成骨情況，強化磷酸三鈣/自體富血小板血漿凝膠復合材料組表達

4、較細胞復合單純強化磷酸三鈣材料組更強。（4）各組在4、8、12周各組均可見OCN、VEGF的mRNA表達條帶出現(xiàn)。比較4、8、12周各組目的條帶和內參灰度值，8、12周時Ⅱ組和Ⅲ組各項表達強于Ⅰ組，Ⅱ組和Ⅲ組之間無明顯差異。OCN、VEGF的mRNA表達呈正相關。 結論:（1）犬骨髓間充質干細胞復合強化磷酸三鈣/自體富血小板血漿凝膠復合支架材料經(jīng)體外誘導后在犬體內能獲得良好的血管化。（2）犬骨髓間充質干細胞復合強化磷酸三鈣/自體