多種新型抗BLyS重組蛋白活性的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、BLyS,B淋巴細胞刺激因子,又叫做BAFF,是腫瘤壞死因子(TNF)超家族的成員之一,在B淋巴細胞的增殖、成熟、維持 B細胞生理功能中起重要的作用。BLyS是通過和其三個受體 BCMA、TACI、BR3相互作用而發(fā)揮其生物學功能的。研究發(fā)現,機體中BLyS過量表達可引起諸如類風濕性關節(jié)炎,系統(tǒng)性紅斑狼瘡,綜合干燥征等疾病的發(fā)生。多種BLyS拮抗劑肽被用于治療小鼠及人類自身性免疫疾病的研究,并取得良好的效果。之前,我們通過計算機設計了多

2、種的B LyS拮抗肽如BC、BA、TA和TC等,結果表明:這些肽可以很好的抑制BLyS與TACI-Fc或BCMA-Fc的結合;814是通過噬菌體庫篩選得到的另一種與BLyS有很好親和力拮抗肽。為了保持肽的穩(wěn)定性,本實驗中,我們利用基因工程技術將拮抗肽與人IgG1的Fc片段結合組成重組質粒,利用原核表達系統(tǒng)獲得多種新型抗BLyS融合蛋白,并用ELIS A的方法對其活性做了進一步研究。具體研究結果如下:
  1構建并純化了BCMA-F

3、c-Myc融合蛋白,競爭性ELISA結果表明, BCMA-Fc對BCMA-Fc-Myc和BLyS的結合抑制率到達80%。建立肽-Fc融合蛋白競爭性抑制BCMA-Fc和BlyS結合能力的評價標準。
  2構建并獲得了無關肽(NP)與Fc融合蛋白表達載體(pET30a-NP-Fc)以及pET30a-BP-Fc、pET30a-BA-Fc、pET28a-3-BP-Fc和pET28a-3-814-Fc融合蛋白。
  3利用間接性ELI

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