HSV-TK-GCV自殺基因系統(tǒng)治療胰腺癌的體外試驗研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的 運用單純皰疹病毒胸腺嘧啶激酶基因(herpes simplex virus thymidine kinase gene,HSV-TK)與核苷類似物GCV所組成的自殺基因系統(tǒng)(suicidegene therapy system)在體外治療人胰腺癌細胞SW1990,研究該系統(tǒng)對腫瘤細胞的抑制及殺傷作用,同時觀察旁觀者效應(yīng),以期為臨床治療胰腺癌提供理論基礎(chǔ)和實驗依據(jù).方法我們通過脂質(zhì)體介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)移方法將含有HSV-TK基因的復(fù)制缺陷

2、型逆轉(zhuǎn)錄病毒載體GINaTK導(dǎo)入空載的包裝細胞PA317,建立包裝細胞系PA317/TK,然后利用該包裝細胞產(chǎn)生的假病毒顆粒感染人胰腺癌細胞SW1990,得到轉(zhuǎn)基因的SW1990/TK細胞.在SW1990/TK細胞培養(yǎng)物中加入抗病毒前體藥物GCV,觀察HSV-TK/GCV自殺基因系統(tǒng)對人胰腺癌細胞生存率的影響.將SW1990和SW1990/TK細胞以不同的比例混合培養(yǎng),加入GCV后觀察旁觀者效應(yīng).結(jié)果 我們成功構(gòu)建了包裝細胞PA317/

3、TK并通過其產(chǎn)生的假病毒顆粒感染靶細胞得到SW1990/TK.實驗結(jié)果表明經(jīng)過轉(zhuǎn)導(dǎo)HSV-TK基因的胰腺癌細胞SW1990/TK對GCV較未經(jīng)轉(zhuǎn)導(dǎo)的SW1990細胞敏感,表現(xiàn)出顯著的生長抑制及殺傷作用(P<0.0025).此外,將基因轉(zhuǎn)導(dǎo)前后的兩種細胞混合培養(yǎng),在加入GCV后觀察到了強烈的旁觀者效應(yīng).結(jié)論 HSV-TK/GCV自殺基因系統(tǒng)對人胰腺癌細胞有顯著的生長抑制及殺傷作用,并且通過旁觀者效應(yīng)加強了這種作用.我們的實驗結(jié)果為胰腺癌的

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