1、目的：研究不同類型清熱中藥的抑菌作用特點(diǎn)的異同，進(jìn)一步獲得清熱中藥的分類的現(xiàn)代數(shù)據(jù)，并開(kāi)展清熱中藥作為抗生素增效劑和益生菌促生長(zhǎng)因子的應(yīng)用開(kāi)發(fā)，旨在為清熱藥的應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)參考。
　　方法：⑴以金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、嗜酸乳桿菌為實(shí)驗(yàn)菌株，采用比濁法測(cè)定不同類型清熱中藥的對(duì)3株細(xì)菌體外的增殖率大小。⑵采用比濁法測(cè)定不同類型清熱中藥對(duì)大腸桿桿菌與金黃色葡萄球菌的最小抑菌濃度（MIC）。分別繪制清熱解毒中藥與清熱燥濕中藥對(duì)金黃色葡萄球

2、菌的生長(zhǎng)曲線及分別建立了清熱解毒中藥與清熱燥濕中藥對(duì)金黃色葡萄球菌生長(zhǎng)曲線的一級(jí)、二級(jí)生長(zhǎng)模型。⑶采用棋盤法測(cè)定清熱復(fù)方與頭孢拉定、左氧氟沙星、阿莫西林、慶大霉素聯(lián)用對(duì)金黃色葡萄球菌的抑菌作用。利用細(xì)胞膜滲透性、糖代謝、磷代謝、AKP的含量測(cè)定、SDS-PAGE電泳等方法，來(lái)闡述清熱復(fù)方的抑菌機(jī)理。⑷以清熱中藥蒲公英作為促生長(zhǎng)因子，采用正交法優(yōu)化嗜酸乳桿菌的基礎(chǔ)培養(yǎng)基。
　　結(jié)果：①清熱燥濕中藥黃芩、黃連、黃柏抑制金黃色葡萄球菌的

3、增殖，與對(duì)照組比較，有顯著性差異（P＜0.05）。清熱燥濕中藥黃連、黃柏、黃芩能抑制大腸桿菌的增殖，與對(duì)照組比較，具有顯著性差異（P＜0.05）。清熱解毒中藥穿心蓮、連翹、板藍(lán)根、菊花、魚(yú)腥草、敗醬草、金銀花對(duì)大腸桿菌無(wú)增殖作用，與對(duì)照組比較，無(wú)顯著性差異（P＞0.05）。清熱燥濕中藥黃連、黃芩、黃柏對(duì)嗜酸乳桿菌有明顯抑制作用。其中黃連、黃芩、黃柏與對(duì)照組比較，具有顯著性差異（P＜0.05）。清熱解毒中藥蒲公英、金銀花、穿心蓮、魚(yú)腥草、

4、敗醬草、板藍(lán)根、連翹對(duì)嗜酸乳桿菌有明顯的增殖作用，與對(duì)照組比較，具有顯著性差異（P＜0.05）。②清熱燥濕中藥黃芩、黃連對(duì)金黃色葡萄球菌具有較強(qiáng)的抑菌作用（≤7.81 mg/mL），清熱燥濕中藥黃柏與清熱解毒中藥金銀花、連翹、蒲公英、板藍(lán)根、穿心蓮、敗醬草對(duì)金黃色葡萄球菌具有中等抑菌作用（15.63~62.5 mg/mL）。清熱解毒中藥黃芩、黃連對(duì)大腸桿菌具有較強(qiáng)抑菌作用（≤7.81 mg/mL）。在 Gompertz生長(zhǎng)預(yù)測(cè)模型的基礎(chǔ)

5、上，建立了在7.81~125 mg/mL條件下金黃色葡萄球菌的μm與質(zhì)量濃度的有效二級(jí)模型。③清熱復(fù)方分別與頭孢拉定、阿莫西林、慶大霉素和左氧氟沙星聯(lián)用對(duì)金黃色葡萄球菌的FIC為0.125、1.00、0.531和0.531。清熱解毒復(fù)方液作用于菌體6 h后，給藥組的電導(dǎo)率比對(duì)照組增加了4.88％（P＜0.05）。清熱復(fù)方提取液孵育0~8 h，各實(shí)驗(yàn)節(jié)點(diǎn)的吸光度差異均小于0.47%（P＞0.05）。清熱解毒復(fù)方與菌液作用0~10 h時(shí)，培

6、養(yǎng)液糖濃度與對(duì)照組的培養(yǎng)液中糖濃度隨作用時(shí)間一直降低。在0~12 h時(shí)，試驗(yàn)組與對(duì)照組磷的濃度一直在降低。清熱復(fù)方液作用于菌體在0~6h胞外可檢測(cè)的磷酸酶含量明顯增加，且顯著高于對(duì)照組。清熱復(fù)方提取液反應(yīng)16 h后，實(shí)驗(yàn)組的可溶性蛋白含量比對(duì)照組有明顯變化。95000Da處，與對(duì)照組相比清熱復(fù)方組明顯增加一條蛋白條帶；130000~95000Da之間，對(duì)照組比清熱復(fù)方組明顯消失了一條蛋白條帶。④采用正交實(shí)驗(yàn)優(yōu)化嗜酸乳的增菌培養(yǎng)基，得出培

7、養(yǎng)基優(yōu)化的最優(yōu)組合為：硫酸鎂0.58g/L，硫酸錳0.25g/L，酵浸母粉20g/L，磷酸氫二鉀2g/L，檸檬酸氫二銨2 g/L，番茄汁150ml/L，乙酸鈉15g/L，葡萄糖2 g/L，蒲公英粉1.0g/L，pH6.4，加入蒸餾水1000 mL。
　　結(jié)論：⑴革蘭氏陽(yáng)性菌比革蘭氏陰性菌對(duì)清熱中藥敏感度高。⑵清熱燥濕藥主要影響金黃色葡萄球菌的最大比生長(zhǎng)速率，清熱解毒藥主要影響金黃色葡萄球菌的滯后期λ。⑶清熱復(fù)方與頭孢拉定、慶大霉素