水稻條紋葉枯病抗性的遺傳分析和基因定位.pdf_第1頁(yè)
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1、水稻條紋葉枯病(rice stripe)是由水稻條紋病毒(rice stripe virus,RSV)引起的病毒病,其傳毒介體主要是灰飛虱(Laodelphax striatellus Fallen)。該病最早于1903年在日本發(fā)現(xiàn),朝鮮、前蘇聯(lián)也有分布。我國(guó)水稻條紋葉枯病最早發(fā)生于1964年,70年代較輕,80年代有所上升,90年代發(fā)病趨勢(shì)逐年加重。目前在江蘇、河南等省已成為重大的爆發(fā)性病害,重病區(qū)的發(fā)病面積占水稻種植面積的90%以上

2、,病穴率高達(dá)70-90%,嚴(yán)重的田塊顆粒無(wú)收,造成了巨大的經(jīng)濟(jì)損失。僅2004年,江蘇省水稻條紋葉枯病發(fā)病面積達(dá)133萬(wàn)hm<'2>,損失達(dá)25億公斤。目前生產(chǎn)上主要通過(guò)改進(jìn)栽培技術(shù)和適期防蟲(chóng)治病相結(jié)合的方法進(jìn)行防治,但由于灰飛虱傳毒的瞬時(shí)性和持久性,防蟲(chóng)治病十分困難,而且化學(xué)殺蟲(chóng)劑的利用存在許多缺點(diǎn):①污染環(huán)境;②在殺滅灰飛虱的同時(shí),也殺死或驅(qū)趕了灰飛虱的天敵,破壞了灰飛虱與天敵的生態(tài)平衡;③一些殺蟲(chóng)劑,如吡蟲(chóng)啉、氯氫菊酯等還能夠刺激

3、灰飛虱雌蟲(chóng)產(chǎn)卵;④長(zhǎng)期使用化學(xué)殺蟲(chóng)劑會(huì)使昆蟲(chóng)產(chǎn)生抗藥性。雖然最近新興推廣應(yīng)用了病毒鈍化劑,但效果并不顯著。因此,選育優(yōu)良的抗病品種,利用品種自身的抗性被認(rèn)為是最經(jīng)濟(jì)有效的方法之一。然而,目前我國(guó)生產(chǎn)上推廣種植的粳稻品種大多高感條紋葉枯病,而且唯一研究比較清楚的抗性基因Stvb-i也未被充分利用。所以挖掘新的抗條紋葉枯病資源,定位新的抗條紋葉枯病基因,利用分子標(biāo)記輔助選擇方法培育高抗條紋葉枯病新品種是當(dāng)前水稻育種的重要任務(wù)。 本研

4、究鑒定了來(lái)自云南、太湖流域等地的314份水稻地方品種對(duì)條紋葉枯病的抗性,并對(duì)其中8個(gè)抗性品種的抗性特性進(jìn)行了研究;同時(shí)還分析了中抗品種IR24、高抗品種IR36、Kasalath和窄葉青8號(hào)對(duì)條紋病毒和介體灰飛虱抗性的數(shù)量性狀基因座。有關(guān)研究結(jié)果如下: 1.對(duì)來(lái)自云南、太湖流域等地的314份地方品種進(jìn)行了條紋葉枯病抗性的篩選,共篩選出高抗品種68份,中抗25份,中感93份,高感128份。然后利用強(qiáng)迫飼毒、集團(tuán)接種、非嗜性測(cè)驗(yàn)、抗

5、生性測(cè)驗(yàn)的方法分析了其中8個(gè)抗性品種的抗性特性,結(jié)果表明IR36、Kasalath、窄葉青8號(hào)、道人橋、DV85,既抗條紋病毒又抗介體灰飛虱,對(duì)條紋葉枯病所表現(xiàn)的抗性是條紋病毒和介體灰飛虱抗性共同作用的結(jié)果;愛(ài)知97和Kenta Nakan抗條紋病毒,但不抗介體灰飛虱,對(duì)條紋葉枯病所表現(xiàn)的抗性是品種對(duì)條紋病毒的抗性;而IR24對(duì)條紋病毒和介體灰飛虱都表現(xiàn)中等抗性。研究結(jié)果為在水稻條紋葉枯病抗性育種中進(jìn)一步利用這些抗源提供了參考。

6、   2.利用Asominori×IR24RIL群體在強(qiáng)迫飼毒和田間鑒定條件下,利用以Asominori為背景的IR24染色體片段置換系(CSSL)群體在田間鑒定條件下,在第11染色體標(biāo)記XNpb257(G257)附近各檢測(cè)到1個(gè)QTL;利用IR36/Nekken2的RIL群體在強(qiáng)迫飼毒和集團(tuán)接種條件下,在第11染色體標(biāo)記區(qū)間RM202-RM287各檢測(cè)到1個(gè)QTL;利用Nipponbare/Kasalath//NipponbareBI

7、L群體在集團(tuán)接種條件下,在第11染色體標(biāo)記區(qū)間S2260-G257檢測(cè)到1個(gè)QTL。將這4個(gè)群體的連鎖圖譜與Temnyth等2001年發(fā)表的連鎖圖譜相比較,發(fā)現(xiàn)XNpb257(G257)與RM287緊密連鎖,而且位于Stvb-i基因所在的標(biāo)記區(qū)間,因而該位點(diǎn)在不同的環(huán)境條件和不同的遺傳背景下都能穩(wěn)定表達(dá),其等位基因?qū)l紋葉枯病抗性的遺傳起主要作用。進(jìn)一步利用Nipponbare/Kasalath//NipponbareBIL群體分析發(fā)現(xiàn)

8、該位點(diǎn)位于SSR標(biāo)記BJll-8與G257的1.9cM之間,與該位點(diǎn)緊密連鎖的SSR標(biāo)記BJll-8無(wú)疑加速了標(biāo)記輔助選擇在我國(guó)抗條紋葉枯病水稻育種中的利用。 3.利用Asominori×IR24RIL群體和相應(yīng)的染色體片段置換系(CSSL)群體,在田間鑒定條件下檢測(cè)到的qSTV3-b與錨定在CSSLl8 IR24片段上的QTL相吻合,表明該QTL表達(dá)穩(wěn)定。利用以Asominori為背景的IR24染色體片段置換系(CSSL)群體在田間鑒

9、定條件下在CSSL5IR24片段上檢測(cè)到1個(gè)主效QTL,而且得到了2005年田間鑒定結(jié)果的進(jìn)一步證實(shí)。但由于利用相應(yīng)的RIL群體沒(méi)被檢測(cè)到,所以該位點(diǎn)的表達(dá)受遺傳背景的影響。進(jìn)一步精細(xì)定位和圖位克隆這兩個(gè)QTLs,對(duì)于研究條紋葉枯病的抗性機(jī)制具有重要的理論和實(shí)際意義,而且這兩個(gè)穩(wěn)定表達(dá)的新位點(diǎn)為條紋葉枯病抗性品種的培育提供了新抗源。4.利用Nipponbare/Kasalath//Nipponbare BIL群體,在第3染色體標(biāo)記R1

10、618-C595和R2170-C1135區(qū)間各檢測(cè)到1個(gè)與介體灰飛虱抗性相關(guān)的QTL(qSBPH3-α,qSBPH3-b),LOD值和貢獻(xiàn)率分別為3.12和2.96,11.69%和11.36%。利用IR36/Nekken2RIL群體在第9、12染色體上標(biāo)記區(qū)間RM257-RMl60和RM19-RM247也分別檢測(cè)到1個(gè)介體灰飛虱抗性相關(guān)的QTL(qSBPH9,qSBPHl2),LOD值分別為1.55、17種奠定了基礎(chǔ)。 5.品種Kasa

11、lath既抗條紋病毒又抗介體灰飛虱,利用Nipponbare/Kasalath∥Nipponbare BIL群體,將條紋病毒和介體灰飛虱抗性QTLs分別定位在第3和第11染色體上,而且條紋病毒和介體灰飛虱抗性并不相關(guān),證明品種Kasalath對(duì)條紋病毒和介體灰飛虱的抗性由不同的基因所控制。 6.秈稻品種窄葉青8號(hào)對(duì)條紋病毒的耐性很強(qiáng),本研究利用窄葉青8號(hào)/武育粳3號(hào)F<,2>群體,構(gòu)建連鎖圖譜,分析對(duì)條紋葉枯病抗性的數(shù)量性狀基因座。強(qiáng)迫

12、飼毒條件下,在第1、7、11染色體上各檢測(cè)到1個(gè)QTL,LOD值在2.0-2.83之間,貢獻(xiàn)率在0.29-12.98%之間;田間鑒定條件下,在1、5、10染色體上各檢測(cè)到1個(gè)QTL,LOD值在2.0-3.06之間,貢獻(xiàn)率為8.27-9.93%。其中在強(qiáng)迫飼毒條件下檢測(cè)到的qSTV7和在田間鑒定條件下檢測(cè)到的qSZV5和qSTV10位點(diǎn),增強(qiáng)抗性的等位基因來(lái)自抗性親本窄葉青8號(hào),暗示窄葉青8號(hào)對(duì)條紋葉枯病的抗性是由微效多基因控制,而且這些

13、基因?qū)Νh(huán)境敏感;在強(qiáng)迫飼毒條件下檢測(cè)到的qSTV1-a和qSTV11以及在田間鑒定條件下檢測(cè)到的qSTV1-b,增強(qiáng)抗性的等位基因來(lái)自感病親本武育粳3號(hào),表明感病親本武育粳3號(hào)也攜帶多個(gè)微效的抗性基因。除此之外,利用Asominori×IR24 RIL群體,在強(qiáng)迫飼毒的條件下在第3、8、11染色體上各檢測(cè)到3個(gè)QTL(qSTV3-a、qSTV8、qSTV11-c),在田間鑒定條件下在第5、7染色體上各檢測(cè)到一個(gè)QTL(qSTV5、qST

14、V7);利用相應(yīng)的IR24染色體片段置換系(CSSL)群體,在CSSL6、CSSL25、CSSL36的IR24片段上各檢測(cè)到1個(gè)QTL,所有這些QTL都是在單個(gè)環(huán)境條件下被檢測(cè)到。 利用IR36/Nekken2 RIL群體,在強(qiáng)迫飼毒和集團(tuán)接種條件下各檢測(cè)到3個(gè)和2個(gè)QTL,其增強(qiáng)抗性的等位基因均來(lái)自IR36,進(jìn)一步分析所檢測(cè)到的QTL間的互作,發(fā)現(xiàn)強(qiáng)迫飼毒條件下檢測(cè)到的3個(gè)位點(diǎn)間,以及集團(tuán)接種條件下檢測(cè)到的2個(gè)位點(diǎn)間均不存在互

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