1、新型肽核酸的設(shè)計(jì)合成及性質(zhì)研究摘要藥物—受體相互作用的實(shí)質(zhì)是分子識(shí)別，藥物研究中的分子識(shí)別是藥物分子對(duì)生物大分子靶的選擇性作用。寡核苷酸通過(guò)Watson-Crick堿基配對(duì)與含互補(bǔ)序列的單鏈DNA或mRNA結(jié)合形成雙螺旋結(jié)構(gòu)，或以Hoogsteen氫鍵結(jié)合到具有特定序列的雙鏈DNA的大溝處，形成三股螺旋結(jié)構(gòu)，上述兩種結(jié)合方式均具有序列特異性。原則上，如果致病基因的核酸序列已知，就可以根椐堿基配對(duì)原則設(shè)計(jì)出反義寡核苷酸的序列，利用反義寡核

2、苷酸與核酸序列的特異性識(shí)別，實(shí)現(xiàn)對(duì)基因表達(dá)的調(diào)控，這是分子生物學(xué)和藥物化學(xué)的研究熱點(diǎn)之一。寡核苷酸及其類似物有可能發(fā)展成為一類以核酸為靶點(diǎn)的直接阻止基因的轉(zhuǎn)錄或翻譯的新一代高選擇性藥物。 但是天然寡核苷酸易被核酸酶降解而使其應(yīng)用受到限制。人們對(duì)天然寡核苷酸的結(jié)構(gòu)進(jìn)行改造，設(shè)計(jì)合成了多種類型的寡核苷酸類似物，但多數(shù)難以成為有效的基因表達(dá)的反義抑制劑。 九十年代初，NielsenP.E.等人設(shè)計(jì)合成了一類新的寡核苷酸類似物-

3、-肽核酸(PeptideNucleicAcids簡(jiǎn)稱PNA)，肽核酸作為反義藥物與寡核苷酸相比在某些方面有一些優(yōu)點(diǎn)。 在寡核苷酸類似物的研究中，為了模擬天然核酸的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)，我們?cè)谥麈溨幸胨臍溥量┉h(huán)來(lái)模擬DNA中的核糖環(huán)，設(shè)計(jì)合成了一類新的寡核苷酸類似物。新型肽核酸是由重復(fù)的結(jié)構(gòu)單元N-(2-氨甲基-4-堿基)四氫吡咯乙酸聚合而成的多肽。 以羥脯氨酸為起始原料，經(jīng)過(guò)酯化，N-芐基化，氨解，還原，氨基保護(hù)，脫芐等一系列反應(yīng)

4、，合成了中間體N-[2-(叔丁氧羰基氨甲基)-4-羥基]四氫吡咯乙酸甲酯[Ⅰ]。中間體[Ⅰ]經(jīng)過(guò)磺酰化后與保護(hù)的堿基進(jìn)行取代反應(yīng)或與保護(hù)的堿的堿基進(jìn)行Mitsunobu反應(yīng)合成了含有四種不同堿基的單體。 以新型肽核酸單體為原料，采用固相多肽合成的方法，制備了兩種新型肽核酸序列p(A10-Lys-NH2)和p(T10-Lys-NH2)，經(jīng)凝膠柱純化和HPLC純化后得到純品，經(jīng)MS確證為目標(biāo)產(chǎn)物。 通過(guò)測(cè)定紫外熔解曲線的方法