1、菌核病是嚴(yán)重影響新疆油葵產(chǎn)量和品質(zhì)的真菌性病害。由于傳統(tǒng)的育種方法周期長(zhǎng)，效率低，受抗性基因資源匱乏的限制，易出現(xiàn)抗性退化的現(xiàn)象，并且具有有性雜交不親和障礙，使得利用這種方法很難得到具有抗性的優(yōu)良品種。隨著基因工程技術(shù)的發(fā)展，農(nóng)桿菌介導(dǎo)法成為改良作物品種的主要技術(shù)手段。天麻抗真菌蛋白(GastrodiaAntifungalProtein，簡(jiǎn)稱(chēng)GAFP)是一種具有廣譜抗真菌活性的蛋白質(zhì)，它對(duì)許多植物真菌病的致病菌離體具有很強(qiáng)的抑制作用，在

2、植物抗真菌病基因工程上有很重要的應(yīng)用價(jià)值。 本研究探討了影響油葵再生頻率的主要因素，建立了油葵高效的植株再生體系；利用農(nóng)桿菌介導(dǎo)法首次將GAFP基因?qū)胄陆涂贩N(系)，研究了影響油葵遺傳轉(zhuǎn)化的主要因素，建立了遺傳轉(zhuǎn)化體系，獲得了經(jīng)PCR檢測(cè)為陽(yáng)性的轉(zhuǎn)基因植株。主要研究結(jié)果如下： 1建立了油葵體細(xì)胞的再生體系(1)確定了適宜的消毒劑及消毒時(shí)間通過(guò)研究發(fā)現(xiàn)將去殼油葵種子70％6酒精浸泡30s后用0.1％HgCl2消毒5m

3、in是油葵種子適宜的滅菌方法。 (2)外植體類(lèi)型的篩選通過(guò)比較不同外植體及外植體不同日齡從而確定培養(yǎng)6h的子葉為建立再生體系的外植體。 (3)芽分化的培養(yǎng)基的篩選通過(guò)研究確定適宜的芽分化培養(yǎng)基為改良MS(MS大量、微量、鐵鹽、B5有機(jī))+KNO30.5％+CH0.05％+6-BAP4mg/L+AgNO36-9mg/L+葡萄糖3％+Phytagel2.6g/L;探討了加入AgNO3對(duì)芽分化的頻率的影響，確定加入6-9mg/

4、LAgNO3可明顯提高芽分化的頻率。同時(shí)發(fā)現(xiàn)供試品系(種)間芽分化頻率影響差異不十分顯著。再生頻率高的是7B7，為84.4％；其次為6B6，為83.3％。 2建立了油葵農(nóng)桿菌介導(dǎo)轉(zhuǎn)化的技術(shù)體系(1)通過(guò)對(duì)不同油葵品種(系)遺傳轉(zhuǎn)化的適宜條件進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)將培養(yǎng)6h的不同油葵品種(系)子葉在OD600=0.7的農(nóng)桿菌中浸泡10-15min后，在含有AS100μmol/L、pH5.4的芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基上22±1℃暗培2d，遺傳轉(zhuǎn)化效率高