1、過(guò)去認(rèn)為惡性腫瘤細(xì)胞可以入侵各種組織并且注入到成年動(dòng)物體內(nèi)會(huì)產(chǎn)生腫瘤。但是最近研究證明注入早期囊胚后癌細(xì)胞的惡性表型可以被逆轉(zhuǎn)為正常狀態(tài)。這說(shuō)明癌細(xì)胞的惡性表型并非其固有的特征，更可能與其周圍的環(huán)境有關(guān)，從微環(huán)境的角度來(lái)尋找抑制腫瘤的方法日益成為腫瘤研究的焦點(diǎn)。本試驗(yàn)建立聚合胚、注射胚兩種體外發(fā)育模型，并結(jié)合實(shí)時(shí)熒光定量Real-time PCR技術(shù)來(lái)研究附植前小鼠胚胎微環(huán)境對(duì)人宮頸癌HeLa細(xì)胞的重編程作用。研究結(jié)果如下：

2、1、聚合胚的制作收集昆明白小鼠的8-細(xì)胞胚胎和桑椹胚，消化透明帶后與50-100個(gè)HeLa細(xì)胞置于同一凹窩中，培養(yǎng)30h-50h。聚合30h后大多數(shù)囊胚已經(jīng)發(fā)育到桑椹胚后期或早期囊胚，囊胚率為70.3％，40h后囊胚率為78.9％，50h后囊胚率為84.6％。 2、注射胚的制作本試驗(yàn)選取充分?jǐn)U張的小鼠囊胚，共注射97枚(每個(gè)胚胎注射15-20個(gè)HeLa細(xì)胞)，經(jīng)24h的培養(yǎng)重新出現(xiàn)膨大囊胚腔的有73枚，囊胚孵化率為75.3％。

3、 3、Real-time PCR檢測(cè)嵌合體中人宮頸癌易感基因mRNA表達(dá)根據(jù)人和小鼠β-actin基因cDNA序列的差別，利用Oligo 6.0設(shè)計(jì)人特異β-actin基因引物。經(jīng)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)人β-actin在聚合胚中有表達(dá)，說(shuō)明HeLa細(xì)胞可以與早期鼠胚發(fā)生聚合。結(jié)果表明，在聚合胚和注射胚中，HeLa細(xì)胞特異表達(dá)的c-myc基因、c-erbB2基因的mRNA產(chǎn)物都顯著降低(P<0.01)。成年人宮頸癌細(xì)胞可以與附植前鼠胚微環(huán)境中