1、本文從促紅細(xì)胞生成素(EPO)出發(fā)，經(jīng)過(guò)動(dòng)物免疫，多克隆抗體的制備以及不同的檢測(cè)抗體的制備等一系列過(guò)程，初步建立了一種靈敏檢測(cè)抗原EPO的方法，從而為簡(jiǎn)潔、經(jīng)濟(jì)、快速的體外檢測(cè)興奮劑EPO打下一定的基礎(chǔ)。通過(guò)對(duì)ELISA方法最佳條件的選擇，確定了ELISA實(shí)驗(yàn)中的最佳底物為T(mén)MB以及酶標(biāo)抗體的適用濃度，確立了比較穩(wěn)定的用于抗原抗體檢測(cè)的不同類(lèi)型的ELISA實(shí)驗(yàn)流程。從抗原EPO出發(fā)，通過(guò)免疫動(dòng)物、制備抗血清以及血清的純化、效價(jià)的測(cè)定等等

2、一系列步驟，獲得了比較可行的免疫不同動(dòng)物的方案。結(jié)合硫酸銨沉淀和層析的方法確立了一種多克隆抗體制備較為簡(jiǎn)潔的實(shí)驗(yàn)流程，獲得了高濃度、高效價(jià)的純度較高的抗EPO的多克隆抗體。所制備抗體的效價(jià)是報(bào)道的多克隆抗體效價(jià)的十倍左右。通過(guò)比較HRP酶標(biāo)記抗體和生物素標(biāo)記抗體等不同的標(biāo)記抗體的方法初步認(rèn)定：HRP酶標(biāo)記抗體的制備條件比較難控制一些，不但由于酶自身的交聯(lián)很容易形成大分子，而且在后續(xù)的檢測(cè)中非特異性吸附相當(dāng)高。而生物素標(biāo)記抗體因?yàn)椴僮鞣奖?/p>