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文檔簡介
1、將轉座子標簽法應用于水稻,構建水稻插入群體,是進行水稻功能基因組學研究的重要手段。本論文研究在玉米轉座子Ds的基礎上,利用雙元表達載體構建了一個帶有質粒拯救系統(tǒng)的Activator/Dissociation(簡稱Ac/Ds)激活轉座子作為插入標簽,通過農(nóng)桿菌轉入水稻,經(jīng)分子生物學方法檢測,獲得了分別含Ac和Ds的單拷貝株系,進行了Ac和Ds的去雄雜交以擴大突變?nèi)后w,為克隆基因研究水稻基因組打下了很好的基礎。獲得主要結果如下: 構
2、建了基于Ac和Ds結構的載體,用于水稻插入群體的建立。其中Ds是含有激活標簽、基因捕獲器結構和質粒拯救系統(tǒng)的載體,利用根癌農(nóng)桿菌(Agrobacteriumtumefaciens)介導的方法將載體轉化粳稻品種中花17的胚性愈傷組織,獲得了35個轉Ac載體的獨立株系,獲得了8個轉Ds的獨立株系。PCR檢測結果表明,含Ac和Ds的轉基因株系全部呈陽性。Southern雜交獲得了15個Ac單拷貝獨立株系,4個Ds單拷貝獨立株系。表明轉座子Ac
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