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1、DEAD-boxRNA解旋酶在RNA的新陳代謝過程中起著重要作用,從RNA的合成到RNA的降解都需要它的存在,同時(shí)它對(duì)植物的生長(zhǎng)發(fā)育和抗逆反應(yīng)中起調(diào)控作用??寺¤b定了一個(gè)水稻DEAD盒RNA解旋酶基因OsBIRHl。OsBIRHl基因全長(zhǎng)cDNA為2167bp,包含一個(gè)1926bp的開放閱讀框,編碼一個(gè)641個(gè)氨基酸組成的蛋白,預(yù)測(cè)分子量為70.8kD。OsBIRHl基因位于水稻第3號(hào)染色體上,由8個(gè)外顯子和7個(gè)內(nèi)含子組成。預(yù)測(cè)的OsB
2、IRHl蛋白包含DEAD盒解旋酶所特有的保守DEAD和HELICc結(jié)構(gòu)域以及保守模體結(jié)構(gòu)。系統(tǒng)進(jìn)化樹分析表明,OsBIRHl與擬南芥和人DEAD盒解旋酶有很高的同源性,氨基酸序列的一致性達(dá)到47%~54%。 為了研究水稻OsBIRHl蛋白的生化特性,我們將OsBIRHl的編碼序列克隆到原核表達(dá)載體pRSET-A中,并純化了重組OsBIRHl蛋白。攜帶有pRSETa-OsBIRHl質(zhì)粒的細(xì)菌經(jīng)IPTG誘導(dǎo),用Ni-NTAHisBi
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