水稻TAA1同源基因的克隆及其功能鑒定.pdf_第1頁(yè)
已閱讀1頁(yè),還剩89頁(yè)未讀, 繼續(xù)免費(fèi)閱讀

下載本文檔

版權(quán)說(shuō)明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請(qǐng)進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)

文檔簡(jiǎn)介

1、避蔭反應(yīng)指喜光植物在被遮蔭時(shí)所產(chǎn)生的一種植物適應(yīng)環(huán)境的可塑性反應(yīng)。植物發(fā)生避蔭反應(yīng)時(shí)會(huì)出現(xiàn)垂直莖和葉柄的伸長(zhǎng),以促使葉片更高,使植物更易于接受光照,該反應(yīng)發(fā)生時(shí)會(huì)表現(xiàn)出一系列的形態(tài)和生理變化,例如擬南芥在被遮蔭時(shí),其下胚軸和葉柄會(huì)快速伸長(zhǎng),葉表面積以及葉綠素會(huì)減少,葉片角度會(huì)發(fā)生改變等;還會(huì)導(dǎo)致?tīng)I(yíng)養(yǎng)組分向快速伸長(zhǎng)的器官(如莖和葉柄)轉(zhuǎn)移,減少在其它組織和器官(如葉片,花,果實(shí)和儲(chǔ)藏器官)的分配。
   水稻是重要的糧食作物,高密

2、度種植引起的避蔭反應(yīng)會(huì)使大部分的生物量轉(zhuǎn)移至莖等伸長(zhǎng)組織,或者株型過(guò)高易引起倒伏,從而導(dǎo)致水稻的減產(chǎn)。因此水稻避蔭反應(yīng)的分子機(jī)制的研究,可以為水稻株型的改良提供重要的分子依據(jù)。
   TAA1(Tryptophan aminotransferase of arabidopsis1,擬南芥的色氨酸轉(zhuǎn)氨酶1)是擬南芥中色氨酸依賴型生長(zhǎng)素合成途徑中的關(guān)鍵酶,研究發(fā)現(xiàn)TAA1參與調(diào)控?cái)M南芥的避蔭反應(yīng),低R/FR(紅光與遠(yuǎn)紅光的比例)的光

3、照(模擬遮蔭)能快速誘導(dǎo)TAA1催化色氨酸(Trp)與丙酮酸(PA)生成吲哚丙酮酸(IPA)的反應(yīng),進(jìn)而促使生長(zhǎng)素的快速合成,加速擬南芥下胚軸的伸長(zhǎng)。為了鑒定水稻中TAA1的同源基因是否也參與了水稻的生長(zhǎng)素合成及避蔭反應(yīng)。本論文主要做了以下工作:
   1,水稻日本晴幼苗在模擬遮蔭條件下,與模擬白光下相比,葉鞘明顯伸長(zhǎng),驗(yàn)證了水稻存在避蔭反應(yīng)。
   2,通過(guò)基因及蛋白質(zhì)序列比對(duì),在水稻基因庫(kù)中我們選取了三個(gè)與TAA1有

4、較高同源性的基因:os01g0717400(OS-1),os01g0717700(OS-2),os05g0169300(OS-3);利用RT-PCR及PCR技術(shù)克隆到這三個(gè)基因的cDNA編碼區(qū)片段。
   3,將克隆得到的OS-1、OS-2、OS-3cDNA編碼區(qū)片段分別連入原核表達(dá)載體pMBP-c,并表達(dá)于大腸桿菌BL21中,體外純化得到融合蛋白。體外酶活檢測(cè)發(fā)現(xiàn),OS-3具有色氨酸轉(zhuǎn)氨酶活性,其最適PH值為8.5,最適反應(yīng)溫

5、度55℃,并對(duì)Trp、Phe、Lue、Ala、Met、His、Tyr、Cys有轉(zhuǎn)氨酶活性。
   4,將克隆得到的OS-1、OS-2、OS-3的cDNA編碼區(qū)片段分別連入植物過(guò)表達(dá)載體pCHF3-YFP中,并表達(dá)于擬南芥TAA1突變型植株sav3-1中,表型分析發(fā)現(xiàn),在模擬遮蔭條件下,轉(zhuǎn)基因擬南芥植株sav3-1/OS-3表現(xiàn)為下胚軸快速伸長(zhǎng),推測(cè)OS-3在轉(zhuǎn)基因擬南芥有色氨酸轉(zhuǎn)氨酶活性,參與了生長(zhǎng)素的合成。
   綜上

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無(wú)特殊說(shuō)明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請(qǐng)下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請(qǐng)聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁(yè)內(nèi)容里面會(huì)有圖紙預(yù)覽,若沒(méi)有圖紙預(yù)覽就沒(méi)有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫(kù)僅提供信息存儲(chǔ)空間,僅對(duì)用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對(duì)用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對(duì)任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請(qǐng)與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對(duì)自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

評(píng)論

0/150

提交評(píng)論